【摘 要】
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目的：探讨谷氨酰胺酶1（glutaminase 1,GLS1）在卡介苗（Bacille Calmette-Guérin,BCG）感染的巨噬细胞中对自噬的调控作用。方法：培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，利用小干扰RNA敲减巨噬细胞内GLS1的表达并结合BCG感染，采用免疫荧光染色、流式细胞术、ELISA和Western blot等技术检测自噬相关指标，阐明GLS1对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调
【机 构】
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西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室宁夏大学生命科学学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.32160162;No.32060160）； 宁夏自然科学基金重点项目（No.2022AAC02009）；
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目的：探讨谷氨酰胺酶1（glutaminase 1,GLS1）在卡介苗（Bacille Calmette-Guérin,BCG）感染的巨噬细胞中对自噬的调控作用。方法：培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，利用小干扰RNA敲减巨噬细胞内GLS1的表达并结合BCG感染，采用免疫荧光染色、流式细胞术、ELISA和Western blot等技术检测自噬相关指标，阐明GLS1对BCG诱导的巨噬细胞自噬的调控作用，并初步探讨其机制。结果：（1）BCG感染巨噬细胞显著增加了LC3B和GLS1的蛋白表达量（P＜0.01），促进了谷氨酰胺分解；（2）敲减GLS1显著增加了巨噬细胞内谷氨酰胺的含量（P＜0.05），同时显著降低了巨噬细胞的自噬率以及自噬相关因子LC3B（P＜0.01）、beclin-1（P＜0.01）和ATG12（P＜0.05）的蛋白表达量；（3）剥夺培养液中的谷氨酰胺处理细胞后，敲减GLS1对BCG感染的巨噬细胞中自噬相关因子LC3B、ATG5和ATG12的表达以及自噬流的发生无显著影响。结论：在BCG感染巨噬细胞RAW264.7过程中，敲减GLS1后可通过增加巨噬细胞内的谷氨酰胺含量抑制细胞自噬。
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