【摘 要】
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目的 基于骨髓瘤细胞株外泌体测序及网络药理学研究当归四逆汤抑制多发性骨髓瘤血管新生的机制,为后续研究提供有针对性的指导.方法 利用TCMSP在线平台及SwissTargetPrediction网站获取当归四逆汤主要化学成分及对应靶点,借助GeneCards获取多发性骨髓瘤血管新生相关靶点基因,经与当归四逆汤作用靶点匹配后,获得当归四逆汤抑制多发性骨髓瘤血管新生的作用靶点,并筛选出相应作用成分.取正常人(n=5)和骨髓瘤患者(n=6)外周血清提取外泌体进行测序,获得差异表达基因.对骨髓瘤细胞外泌体进行全转录
【机 构】
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山东中医药大学中医学院,山东 济南250013;山东中医药大学附属医院质控办,山东 济南250013;山东中医药大学附属医院血液科,山东 济南250013
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目的 基于骨髓瘤细胞株外泌体测序及网络药理学研究当归四逆汤抑制多发性骨髓瘤血管新生的机制,为后续研究提供有针对性的指导.方法 利用TCMSP在线平台及SwissTargetPrediction网站获取当归四逆汤主要化学成分及对应靶点,借助GeneCards获取多发性骨髓瘤血管新生相关靶点基因,经与当归四逆汤作用靶点匹配后,获得当归四逆汤抑制多发性骨髓瘤血管新生的作用靶点,并筛选出相应作用成分.取正常人(n=5)和骨髓瘤患者(n=6)外周血清提取外泌体进行测序,获得差异表达基因.对骨髓瘤细胞外泌体进行全转录组测序,取交集后获得骨髓瘤来源外泌体差异表达基因.进而与当归四逆汤抑制多发性骨髓瘤血管新生的作用靶点匹配,获得当归四逆汤干预外泌体抑制多发性骨髓瘤的作用靶点.借助STRING平台与Cytoscape 3.8.2软件对靶点间相互作用网络进行分析,并利用Metascape网站进行GO功能和KEGG通路富集分析.运用R语言对结果进行可视化处理.最后对主要有效成分和作用靶点进行分子对接验证.结果 当归四逆汤作用于多发性骨髓瘤血管新生的有效成分有117种,干预外泌体发挥作用的相关靶点39个,包括CCND1、EGF等.GO分析结果显示,当归四逆汤作用于多发性骨髓瘤血管新生潜在靶点的生物功能涉及血管新生、血管系统发育、细胞周期调节等.KEGG通路富集显示,当归四逆汤作用于多发性骨髓瘤血管新生潜在靶点的通路主要涉及PI3K-AKT、HIF-1等与VEGF相关的信号通路等.分子对接结果表明主要有效成分槲皮素、桦木酸与关键作用靶点AKT1之间具有良好的对接活性.结论 本研究初步揭示了当归四逆汤能够通过PI3K-AKT、HIF-1通路干预外泌体抑制多发性骨髓瘤血管新生,为进一步的实验研究提供基础.
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