【摘 要】
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目的：构建mTOR shRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制T细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法：设计合成针对小鼠mTOR基因的shRNA片段,与酶切后的pLKD.UBC.GFP.U6载体片段
【机 构】
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福建省立医院肝胆外科,福建医科大学省立临床医学院肝胆外科
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目的：构建mTOR shRNA慢病毒表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制T细胞mTOR基因的相关研究奠定基础。方法：设计合成针对小鼠mTOR基因的shRNA片段,与酶切后的pLKD.UBC.GFP.U6载体片段进行连接并转化DH5α,提取阳性克隆质粒,测序,转染293T细胞。通过GFP表达水平测定病毒滴度。结果：DNA测序结果及PCR鉴定证实成功构建小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为1.38E＋08 TU/ml。结论：成功构建并包装小鼠mTOR-shRNA重组慢病毒表达载
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