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目的 建立能够同时测定4种乌头属中药(生川乌、制川乌、草乌和制草乌)中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱3种有效成分的高效液相色谱法.方法 采用高效液相色谱法测定4种乌头属中药中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的含量.流动相采用10 mmol/L乙酸铵水溶液:乙腈(72:28);检测波长:232 nm;色谱柱:ZORBAX Eclipse Plus C18柱;柱温:35℃;流速:1.5 ml/min.结果 乌头碱、新乌头碱和次乌头碱在2.5-250μg/ml浓度范围内,均呈良好的线性关系,乌头碱线性方程:Y=4.9344X+0.7928(r=0.9997),新乌头碱线性方程:Y=7.6304X+4.8092(r=0.9997),次乌头碱线性方程:Y=7.1914X+4.5630(r=0.9997).乌头碱、新乌头碱和次乌头碱精密度、稳定性和重复性相对标准偏差均满足测定要求.结论 本研究建立的高效液相色谱法能够同时测定生川乌、制川乌、草乌和制草乌4种乌头属中药中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱3种有效成分,且方法操作简便、快速.