【摘 要】
：
为了制备奶山羊乳铁蛋白的多克隆抗体,为进一步的试验提供材料,该研究运用软件分析并选取最适合原核表达的LF序列进行扩增,将扩增出的序列与pET-32a（+）质粒连接,形成原核表达质粒pET-32a-LF,将质粒转化入大肠杆菌,在最适条件（37℃、0.5 mmol/L IPTG、4 h）下诱导表达出大量蛋白。通过Ni-NTA Resin法将蛋白纯化后皮下注射4月龄新西兰大耳兔,免疫注射结束后采集抗体血
【基金项目】
：
陕西省创新能力支撑计划（2021TD-31）； 西安市科技计划项目（20NYYF0030）； 陕西省农业科技创新驱动项目（NYKJ-2021-YL（XN）09）；
论文部分内容阅读
为了制备奶山羊乳铁蛋白的多克隆抗体,为进一步的试验提供材料,该研究运用软件分析并选取最适合原核表达的LF序列进行扩增,将扩增出的序列与pET-32a（+）质粒连接,形成原核表达质粒pET-32a-LF,将质粒转化入大肠杆菌,在最适条件（37℃、0.5 mmol/L IPTG、4 h）下诱导表达出大量蛋白。通过Ni-NTA Resin法将蛋白纯化后皮下注射4月龄新西兰大耳兔,免疫注射结束后采集抗体血清,并用间接酶联免疫吸附法和免疫印迹法检测多抗的效价及特异性。结果显示克隆得到适合原核表达的279 bp的LF CDS片段,pET-32a（+）-LF原核表达载体成功构建并顺利表达（未形成包涵体）,表达的截短蛋白大小为10 kD。抗体效价达到1:107;免疫印迹试验结果显示,原核表达的LF蛋白和山羊乳腺上皮细胞中的LF蛋白能够被该抗体特异性识别。
其他文献
国务院国资委和各中央企业深入贯彻习近平新时代中国特色社会主义思想,以总体国家安全观为指引,根据风险防范新形势、应急工作新任务,着力改革发展,不断完善创新,促进中央企业应急管理水平持续提升。一、建章立制、规范管理,各项工作取得积极进展近年来,国资委和各中央企业积极落实党中央、国务院关于应急管理工作的决策部署,逐步
琴,作为中国传统音乐文化之象征被历代文人雅士所好,故《礼记》中载"士无故不撤琴瑟"。文人们或借琴抒怀,宣表清高不俗之理想,或以琴为伴,体味多彩生活之乐趣。这种"以琴结缘"的闲雅生活恰恰体现了中国传统文化中独有的休闲智慧。使他们在平心养疾的同时,于"庙堂"和"江湖"之间为自己建造了一个可以自由舒放的"精神花园"。
大江健三郎是日本战后派代表作家之一,其文学表现出明显的阶段性特征。二战后,西方存在主义思想恰好符合大江当时的心境,从而对大江的创作产生了极大的影响。通过对大江健三郎中期作品《个人的体验》的分析,考察了作者是如何通过塑造"鸟"这一形象来接受和消化萨特存在主义哲学思想的。个人生活的不幸与民族苦难的遭际带给大江健三郎全新的人生体验,而这些体验又成为《个人的体验》创作的直接源泉。主人公"鸟"在经历了"痛苦
死亡是博尔赫斯作品永恒的主题之一。本文以博尔赫斯短篇小说《永生》为例,同时联系加缪《西西弗神话》中的存在主义精神结合分析,可以看出博尔赫斯对死亡的哲思,对虚无主义和荒诞生活的反抗。
近年来,推动积极老龄化与健康老龄化建设受到社会广泛关注与高度重视,这也顺应了我国今后一段时间的基本国情。文章通过对存在主义的关键话语进行解读,建构老年主体性概念,即老年人自我的社会构建与自由的解放,从中理解老年主体性本身存在的局限,包括区域化的人生、再创造的生命历程、家庭指导关怀与爱、道德责任与意识的四维困境,提出构建老年主体的意向性、本真性及共同成长的关系,以获得主体上的宽舒,实现老年人生的自由
《金色笔记》是英国当代女作家多丽丝·莱辛突破传统小说结构的一部长篇小说。《金色笔记》不分章节,由一个故事,五本笔记构成,主要讲述了女主人公安娜·沃尔夫的个人生活及自我追求直至重新开始写作,最终实现自我超越的过程。本文主要从存在主义中的存在、自由、人道主义理论角度去解读小说中安娜的自我超越。面对分裂、混乱的人生,安娜最终找到了人生的价值,存在即是自由,维持价值存在的正是她自己。
现象学存在主义通过20世纪法国哲学三大主题（语言、身体、他者）的转向合谋瓦解了早期现代以内在性为指向的意识哲学、主体形而上学。戈达尔的电影将现象学存在主义所建构存在（being）的中心命题进行了影像化的表达,其早期电影的特性具体表现为:非中心化叙事的散文电影、身体出场的体感扩充及他者浮现的相对他性三个方面。而二者背后的哲学理路共同指向了在主体性形而上学瓦解的过程中所产生的当代法国哲学的现代性危机。
流速在泥石流防治工程设计中处于重要地位,如何有效获取准确的流速十分关键。在泥石流拦挡工程设计时往往采用平均流速,而对近年来陇南地区泥石流拦挡工程的调查,发现泥石流流速在横向断面分布上具有一定的不均匀性,导致部分拦挡坝体中部易遭受损毁。在"甘肃武都火烧沟"公式基础上,基于冲淤平衡等合理化假设,利用数学积分原理,提出泥石流横向分布计算公式,可供防治工程设计时参考借鉴。
生物多样性是一国社会经济发展最重要的物质基础之一。中国现有的生物多样性法律体系存在“主流化”规范缺失、对生物安全保障回应不足等问题。在生态文明的语境下，应基于生态发展观、生态协同观和生态合作观，实现多元价值协调，遵循整体主义的生物多样性法治路径，推动全球生物多样性治理。为此，应充分利用环境法法典化的契机，推进生物多样性法律体系化；以风险预防为原则，健全和完善关键制度；健全协调机制，完善生物多样性管
随着国家对塑料污染治理从原来的"限塑"提升到"禁塑",而可降解塑料PBAT的原材料主要有1,4-丁二醇、对苯二甲酸和己二酸,生产1吨PBAT需要0.43吨1,4-丁二醇,由于1,4-丁二醇产品的市场巨大需求,促进了该行业的飞速发展。1,4-丁二醇简称BDO,是有机化工和精细化工的重要原料,在医药、汽车、化工和纺织等领域得到了广泛的应用,其主要用来生产γ-丁内脂、四氢呋喃、聚四亚甲基醚二醇、聚氨脂和