【摘 要】
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为获得大量高纯度的柑桔黄龙病菌Omp外膜重组蛋白,应用PCR方法从染病柑桔模板中扩增出黄龙病菌omp基因的3个片段,将其克隆到pMDl9-T载体,再亚克隆到pET32a原核表达载体,构建p
【机 构】
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广东省农科院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室,浙江省农科院果树研究所,南京农业大学植物保护学院
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为获得大量高纯度的柑桔黄龙病菌Omp外膜重组蛋白,应用PCR方法从染病柑桔模板中扩增出黄龙病菌omp基因的3个片段,将其克隆到pMDl9-T载体,再亚克隆到pET32a原核表达载体,构建pET32a-omp原核表达重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21（DE3）,经IPTG诱导并用SDS-PAGE电泳检测带组氨酸标签的Omp融合蛋白表达后,用镍柱分离纯化该融合蛋白.结果表明：柑桔黄龙病菌omp基因序列的两个片段在37℃经1 mmol/L IPTG诱导后,在大肠杆菌得到了高效表达;镍柱纯化蛋白得到预期大小（约5
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