【摘 要】
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[目的]瘦素(leptin,Lep)是调节脊椎动物食物摄入和能量稳态的关键因子,主要由白色脂肪组织产生,作为能量储备的内分泌指标,瘦素可通过与瘦素受体(leptin receptor,LepR)结合,在摄食、能量平衡、生长生殖以及神经内分泌等方面发挥着重要作用.到目前为止,许多研究已经提供了在硬骨鱼中存在多种Lep基因的证据,但是在黄鳝中关于Lep基因的研究还未见报道.通过对Lep/LepR系统的分子克隆及组织表达特性分析给黄鳝能量代谢稳态研究提供一定的基础.[方法]以黄鳝肝脏cDNA为模板,采用巢式PC
【机 构】
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江西农业大学 生物科学与工程学院,江西 南昌 330045;江西农业大学 动物科学技术学院,江西 南昌 330045
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[目的]瘦素(leptin,Lep)是调节脊椎动物食物摄入和能量稳态的关键因子,主要由白色脂肪组织产生,作为能量储备的内分泌指标,瘦素可通过与瘦素受体(leptin receptor,LepR)结合,在摄食、能量平衡、生长生殖以及神经内分泌等方面发挥着重要作用.到目前为止,许多研究已经提供了在硬骨鱼中存在多种Lep基因的证据,但是在黄鳝中关于Lep基因的研究还未见报道.通过对Lep/LepR系统的分子克隆及组织表达特性分析给黄鳝能量代谢稳态研究提供一定的基础.[方法]以黄鳝肝脏cDNA为模板,采用巢式PCR的方法和TA克隆技术获得Lep和LepR两个基因ORF序列,对他们进行生物信息学和组织分布分析.[结果]生物信息学分析结果显示Lep和LepR基因的ORF序列长度分别为486 bp和3537 bp,分别编码161和1178个氨基酸;推测其蛋白质成熟肽的分子量分别为15.62 kDa和132.24 ku,等电点分别为5.57和4.94.三维结构模型预测显示黄鳝Lep蛋白由4个螺旋组成和其他物种Lep蛋白有很高的保守型,而黄鳝LepR包含脊椎动物LepR中一些重要的功能域,包括3个纤连蛋白III型结构域、1个免疫球蛋白结构域.同源性分析发现黄鳝Lep蛋白与斜带石斑鱼的同源性最高为90.68％,而LepR蛋白质则与大黄鱼同源性最高为78.55％.系统发育上,黄鳝Lep和LepR均与硬骨鱼棘鳍总目的亲缘关系较近.组织分布分析表明,黄鳝Lep mRNA在胃中表达最高,在性腺、大脑和下丘脑中也有较高表达,而LepR mRNA则在下丘脑中有最高表达,其次在肝脏、大脑、性腺和胃中也有较高量的表达.[结论]通过对瘦素及其受体的表达分布分析可以推断它们可能在黄鳝的生殖及营养代谢方面发挥重要作用.
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