靶向EphB4基因的shRNA真核表达载体的构建与鉴定

来源 :苏州大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wongbo

【摘要】

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目的构建和鉴定靶向EphB4基因的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体。方法体外合成一对互补并编码靶向EphB4基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸，克隆到经BbsI酶切线性化的psiRNA人H1启

【作者】

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张艳荣董万利胡锦惠国桢

【机构】

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苏州大学附属第一医院神经内科,上海交通大学附属第六人民医院神经外科,苏州大学附属第一医院神经外科

【出处】

：

苏州大学学报：医学版

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

EPHB4 短发夹RNA 恶性胶质瘤载体构建 EphB4 shRNA malignant glioma vector construction

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目（30371459）,上海科学技术发展基金资助项目（034047）

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目的构建和鉴定靶向EphB4基因的短发夹RNA（shRNA）真核表达载体。方法体外合成一对互补并编码靶向EphB4基因的特异性shRNA序列的寡核苷酸，克隆到经BbsI酶切线性化的psiRNA人H1启动子质粒载体中，经酶切和测序鉴定所构建的重组载体是否正确；采用脂质体转染的方法将构建的重组载体导入人恶性胶质瘤细胞系U251中，采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测转染细胞EphB4mRNA的表达变化。结果经酶切和测序证明，pH1-EphB4-shRNA序列正确；转染pH1-EphB4-shRNA载体

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