【摘 要】
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为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因,本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料样品中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆至pMD18-T载体中,测序后进行分析。将BPV2沙湾株L1基
【机 构】
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石河子大学动物科技学院,中国农业科学院兰州兽医研究所
【基金项目】
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兵团国际科技合作项目(2012BC006);农业公益行业专项子课题(201303037-5)
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为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基因,本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料样品中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆至pMD18-T载体中,测序后进行分析。将BPV2沙湾株L1基因亚克隆于原核表达质粒pGEX4T-1中,经IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS-PAGE和western blot分析。SDS-PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80 ku的重组蛋白;western blot显示该蛋白可以与抗BPV2多克隆抗体发生反应。小鼠免疫试验表明,BPV2 L1重组蛋白可以诱导小鼠产生抗BPV2 L1特异性抗体;琼脂扩散试验显示,重组L1蛋白具有良好的免疫原性。本研究原核表达BPV2 L1蛋白,并证明其具有良好的反应原性及免疫原性,为牛乳头瘤病的疫苗和诊断试剂研发奠定了基础。
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