【摘 要】
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采用0.5% Triton X-100破碎细胞,15% Percoll分离盐藻细胞核,25 mM二碘水杨酸锂(lithium diiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K-SDS处理,酚
【机 构】
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郑州大学细胞生物学研究室,河南中医学院生理教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金，国家高技术研究发展计划(863计划)
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采用0.5% Triton X-100破碎细胞,15% Percoll分离盐藻细胞核,25 mM二碘水杨酸锂(lithium diiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,限制酶消化除去结合松弛的DNA,蛋白酶K-SDS处理,酚/氯仿抽提,乙醇沉淀提取核基质附着DNA,限制酶酶切连至pUC18载体上构建MARs文库.随机挑选6个克隆进行体外结合实验筛选,筛选出一能与核基质结合的克隆,测序分析结果表明该序列具明显的MAR序列特征.
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