【摘 要】
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目的 探讨钙网蛋白(CRT)对人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2增殖及侵袭能力的影响.方法 利用siRNA沉默肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2 CRT的表达.通过免疫荧光技术及蛋白印迹法检测
【机 构】
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450052,郑州大学第一附属医院肝胆胰外科河南省消化器官移植重点实验室450052,郑州大学第一附属医院肿瘤科;
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目的 探讨钙网蛋白(CRT)对人肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2增殖及侵袭能力的影响.方法 利用siRNA沉默肝癌细胞株SMMC-7721、HepG2 CRT的表达.通过免疫荧光技术及蛋白印迹法检测CRT siRNA转染效果;Cell counting kit-8(CCK-8)检测细胞的增殖;采用流式细胞术检测细胞凋亡率变化;运用Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力;蛋白印迹法检测p-Akt、Akt蛋白表达.结果 siRNA实验组SMMC-7721和HepG2细胞24、36、48 h相对生长抑制率分别为(41.0±2.2)％、(46.5±1.6)％、(59.7±2.2)％和(36.8±2.7)％、(47.3±1.8)％、(61.5±3.2)％.与空白组及阴性对照组比较,siRNA实验组增殖能力明显降低(P＜0.05).沉默CRT 36 h后SMMC-7721、HepG2细胞的凋亡率分别(45.2±9.1)％、(48.9±8.0)％.与空白组及阴性对照组比较,siRNA实验组凋亡率上调(P＜0.05).Transwell实验显示:沉默CRT 36 h后SMMC-7721和HepG2细胞穿膜个数空白组、阴性对照组、siRNA实验组分别为:(96.8±7.3)、(95.6±5.4)、(34.0±4.2)和(124.0±9.9)、(121.6 ±7.0)、(70.4 ±9.5).与空白组及阴性对照组比较,实验组侵袭能力降低(P＜0.05).沉默CRT 36 h后,与空白组及阴性对照组比较,p-Akt蛋白表达水平均下调(P＜0.05).结论 沉默肝癌细胞CRT对肝癌细胞的增殖、侵袭能力有明显的抑制作用,同时可诱导细胞的凋亡,且与PI3K/Akt信号通路相关.
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