【摘 要】
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目的 探讨miRNA-21对机械力作用下小鼠成纤维细胞系L929细胞的增殖和凋亡的影响.方法 细胞培养与转染将L929细胞接种于细胞培养基(RPMI-1640)中,实验选用对数生长期长势良好
【机 构】
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武汉大学人民医院妇二科, 湖北 武汉,430060
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目的 探讨miRNA-21对机械力作用下小鼠成纤维细胞系L929细胞的增殖和凋亡的影响.方法 细胞培养与转染将L929细胞接种于细胞培养基(RPMI-1640)中,实验选用对数生长期长势良好的细胞,将细胞浓度调整为1×105/mL,接种于无菌的6孔板中,并分为阴性对照组(转染随机序列)、空白组及miRNA-21过表达组.miRNA-21过表达组采用miRNA-21模拟物(miRNA-21mimics)上调小鼠成纤维细胞内miRNA-21的表达.使用四点弯曲细胞力学加载系统对两组细胞分别进行力学加载,建立压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)细胞模型,加力大小为0、5333μstrain(4 mm),加载时间设定为4 h.使用CCK-8法检测各组细胞增殖,流式细胞仪检测各组细胞凋亡.结果 与对照组及miRNA-21过表达组相比,加力组的细胞增殖活性明显下降,细胞凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.001);而与加力组相比,miRNA-21过表达+加力组的细胞增殖活性显著上升,细胞凋亡率明显下降,差异有统计学意义(P<0.001).结论 miRNA-21模拟物可通过上调小鼠成纤维细胞中miRNA-21的表达,影响机械力作用下小鼠成纤维细胞的增殖和凋亡,可能成为SUI生物治疗的新靶点.
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