【摘 要】
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【目的】本研究对从泡叶藻(Ascophyllum nodosum)中提取的泡叶藻聚糖(ascophyllan, As)进行化学法降解,将得到的低分子量降解产物进行分离纯化,并分析其基本组成特征和体外免疫诱
【机 构】
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集美大学食品与生物工程学院; 福建省食品微生物与酶工程重点实验室; 厦门南方海洋研究中心经济海藻资源化利用重点实验室; 厦门市食品生物工程技术研究中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(31501441);福建省高校杰出青年科研人才培育计划项目(B16166)
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【目的】本研究对从泡叶藻(Ascophyllum nodosum)中提取的泡叶藻聚糖(ascophyllan, As)进行化学法降解,将得到的低分子量降解产物进行分离纯化,并分析其基本组成特征和体外免疫诱导活性,为泡叶藻聚糖或其他海藻多糖的生物活性和基本结构特征研究提供参考。【方法】通过酸水解法和双氧水氧化降解法制备泡叶藻聚糖低分子量降解片段,利用超滤法和SephadexG-50凝胶过滤柱层析分离纯化得到4个泡叶藻聚糖低分子量片段:HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2;采用ABEE柱前衍生、高效液相色谱(HPLC)及化学方法分析其单糖组成和化学组成;采用高效分子排阻色谱法(HPSEC)测定其重均分子量;通过小鼠巨噬细胞(RAW264.7)模型分析HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2的体外免疫诱导活性。【结果】组成特征结果表明HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F1、H2O2-F2均为杂多糖且单糖组成存在较大差异,其重均分质量分别为3.70、3.60、3.70和3.40 kDa。免疫活性分析细胞模型结果表明HCl-F1、HCl-F2、H2O2-F2在所测定浓度范围内(0~200μg/mL)能显著诱导RAW264.7细胞活化,释放NO和TNF-α,而H2O2-F1诱导RAW264.7细胞释放NO和TNF-α的活性显著低于片段HCl-F1、HCl-F2和H2O2-F2。【结论】泡叶藻聚糖低分子量降解片段(HCl-F1、HCl-F2和H2O2-F2)具有显著免疫诱导活性,其中HCl-F1和H2O2-F2的免疫诱导活性显著高于泡叶藻聚糖(As)。结合其化学组成分析的结果,提示泡叶藻聚糖低分子量降解片段的免疫诱导活性是由单糖组成和硫酸根含量共同决定的。
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