泛素在多器官功能障碍综合征小鼠脾脏中表达变化及其对树突细胞免疫调节作用的影响

来源 :中国危重病急救医学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xianyekong
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目的 探讨多器官功能障碍综合征(MODS)脾脏中泛素(Ub)的表达变化及意义,研究泛素化主要组织相容性复合物Ⅱ(MHCⅡ)对树突细胞(DC)活性及免疫调节作用的影响.方法 210只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为正常对照组(30只)和MODS组(180只),通过腹腔注射酵母多糖悬液复制MODS模型,MODS组再随机均分为6、12、24、48 h和5~7d、10 ~ 12 d组.采用免疫组化和免疫荧光法分别检测脾脏中Ub蛋白及CD11c+DC细胞和MHCⅡ类分子Ⅰ-Ab的表达;荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测脾脏内Ub mRNA表达.结果 ①免疫组化显示:与正常对照组比较,MODS组伤后6h脾脏Ub阳性细胞逐渐增多,24 h达高峰[(16.83±0.38)%比(8.60±0.86)%,P<0.05],后逐渐下降,至10~12 d Ub阳性细胞已显著低于正常对照组[(4.66±0.34)%比(8.60±0.86)%,P< 0.05].②荧光定量RT-PCR显示:与正常对照组比较,MODS组伤后6 h Ub mRNA表达增强,至24 h达高峰(2.17±0.20比1.00±0.00,P<0.01),随后逐渐下降,至10~ 12d表达已显著低于正常对照组(0.72±0.08比1.00±0.00,P<0.05).③免疫荧光标记显示:与正常对照组比较,MODS组伤后6 h CD1 1c+DC细胞明显增加,至24 h达高峰[(7.55±0.04)%比(2.08±0.13)%,P< 0.05],随后明显减少,至10~12 d已接近正常对照组[(2.28±0.06)%比(2.08±0.13)%,P>0.05].MODS组伤后6 h Ⅰ-Ab阳性细胞明显增加[(10.90±1.40)%比(5.78±0.47)%,P<0.01],24 h表达明显下降[(3.32±0.91)%比(5.78±0.47)%,P<0.05],48 h、5~7d恢复至正常对照组水平后,10~12 d再次显著降低[(2.20±0.97)%比(5.78±0.47)%,p<0.05].Ub阳性细胞数与Ⅰ-Ab、CD11c均呈显著正相关(n=0.899,r2=0.987,均P<0.05).结论 Ub可能通过泛素化DC表面的MHCⅡ类分子影响DC成熟和活化,从而影响MODS各时期的免疫应答,为调控免疫应答提供新的认识途径与监测指标.
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