【摘 要】
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目的利用RNA干扰技术特异性抑制乳腺癌MCF-7细胞中血管内皮生因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)的基因表达,体内外实验研究下调VEGF-C后对乳腺癌增殖及淋
【机 构】
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广州医科大学病理学教研室; 广州市第一人民医院血液内科;
【基金项目】
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教育部博士点基金(20134423110001);广东省自然科学基金(S2012010010181);广东省医学科研基金(B2010141);广州市教育局市属高校科研项目(10A165)
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目的利用RNA干扰技术特异性抑制乳腺癌MCF-7细胞中血管内皮生因子C(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)的基因表达,体内外实验研究下调VEGF-C后对乳腺癌增殖及淋巴结转移的影响。方法利用重组质粒pSIREN-VEGF-C转染乳腺癌MCF-7细胞并筛选稳定表达细胞株,观察转染前后MCF-7细胞中VEGF-C基因的表达情况及对细胞增殖的影响;以稳定表达细胞株建立乳腺癌裸鼠原位移植瘤模型并观察下调VEGF-C基因后对肿瘤淋巴管生成及肿瘤生长转移的影响。结果转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-C mRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%(P<0.001)和100%,P=0.018。转染后的MCF-7细胞增殖明显受抑制,P<0.05。转染细胞移植瘤的淋巴管生成明显减少,重组质粒组移植瘤中的LMVD为18.23±1.56,较空白对照组的34.50±1.13明显减少,P<0.001;生长速度较对照组缓慢,重组质粒组平均成瘤时间为(14.00±2.13)d,较空白对照组(7.92±1.95)d时间长,P=0.021;重组质粒组肿瘤体积为(706±58)mm3,低于空白对照组(1 285±262)mm3,P=0.020;重组质粒组的转移淋巴结数目为0.45±0.23,明显低于空白对照组1.50±0.45,P=0.021。结论表达VEGF-C shRNA的重组质粒载体pSIREN-VEGF-C在体内外均能高效、特异地发挥靶基因沉默作用,并对乳腺癌细胞的增殖及淋巴转移有显著抑制作用。
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