【摘 要】
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目的分析沉默冠状动脉血管内皮细胞(HCAEC)miR-223的表达,研究miR-223对川崎病(Kawasaki disease,KD)冠状动脉血管内皮细胞凋亡和管腔形成的影响。方法收集正常儿童和川崎病
【机 构】
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广州优迪生物科技股份有限公司; 威海市立医院南院区肿瘤科;
【基金项目】
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广东省科技计划项目(编号:2016A010119067)
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目的分析沉默冠状动脉血管内皮细胞(HCAEC)miR-223的表达,研究miR-223对川崎病(Kawasaki disease,KD)冠状动脉血管内皮细胞凋亡和管腔形成的影响。方法收集正常儿童和川崎病儿童的血清。将实验分为3组:正常儿童患者血清组(N组)、川崎病患者血清阴性组(KD组)、川崎病患者血清+miR-223 inhibitor组(M组),每组均处理HCAEC细胞48 h。QRT-PCR法检测各组细胞miR-223、内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitricoxide synthase,eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase,iNOS)mRNA的表达。化学比色法检测各组细胞上清NO的表达。流式细胞术检测其凋亡情况。Matirgel胶体外管腔形成试验检测HCAEC细胞管腔形成。结果 QRT-PCR检测结果表明,miR-223 inhibitor干扰可显著降低iNOS mRNA表达量(P<0.05),提高eNOS mRNA表达量(P<0.05)。KD组细胞凋亡率增加,管腔数量增多,miR-223 inhibitor干扰可降低细胞凋亡,降低管腔形成数量(P<0.05)。结论沉默miR-223的表达可使冠状动脉血管内皮细胞凋亡减少,NO表达降低,HCAEC生成血管数减少。miR-223可能是川崎病冠状动脉损害基因治疗的潜在靶基因之一,用来预测冠状动脉瘤的形成。
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