【摘 要】
：
目的 对重组猪尿酸氧化酶(recombinant porcine urate oxidase,rPUOX)进行突变改造,以增加rPUOX上可供聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)耦合的赖氨酸(Lys)残基数,探究PEG修
【机 构】
：
长江大学动物科学学院,湖北荆州434025;长江大学生命科学学院,湖北荆州434025
论文部分内容阅读
目的 对重组猪尿酸氧化酶(recombinant porcine urate oxidase,rPUOX)进行突变改造,以增加rPUOX上可供聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)耦合的赖氨酸(Lys)残基数,探究PEG修饰对改造前后的酶液在SPF鸡体内的药效和抗原屏蔽作用的影响.方法 对纯化的基因改造前后的rPUOX进行PEG化修饰,修饰蛋白静脉注射SPF鸡,共4次,每次间隔7d.实验分为20×5K PEG-rPUOX-215组、20×5K PEG-rPUOX组和空白对照组(0.9％生理盐水).于鸡翼根静脉处采血,用血糖尿酸测试仪及尿酸测试条测定尿酸浓度,酶反应-紫外分光光度法检测尿酸酶活性,间接ELISA法检测免疫原性.结果 20×5K PEG-rPUOX-215和20×5K PEG-rPUOX均获得充分修饰,且前者修饰效果更好.第1、2次注射,降低鸡血尿酸幅度20×5K PEG-rPUOX-215组高于20×5K PEG-rPUOX组约11％和6％.3次注射药效维持时间20×5K PEG-rPUOX组相较于20×5K PEG-rPUOX-215组逐次降低0、24和48 h.20×5K PEG-rPUOX-215组抗体产生速率相对较慢,且14 d抗体阳性率低于20×5K PEG-rPUOX组约14.3％.结论 20×5K PEG-rPUOX-215修饰后药效学作用更显著,药物半衰期延长,且免疫原性相对较低,为研制低免疫原性的rPUOX及实现临床上多次给药提供了新的方法和思路.
其他文献
目的探讨结肠癌转移相关基因-1(metastasis-associated in colon cancer-1,MACC1)在结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)的表达及临床病理意义。方法免疫组织化学检测MACC1在77例CRC及其正常黏膜组织的表达及分析其临床病理意义。HPA和GEPIA数据库分析MACC1在CRC的mRNA和蛋白表达以及与预后的关系,GEPIA数据库分析MACC1表达与错配修复基因的相关性及与CRC临床分期的关系。结果MACC1在CRC的阳性表达率为75.32%
目的 本研究旨在探讨LncRNA MEG3吸附miR-328对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)滑膜细胞增殖、凋亡以及炎性反应的影响.方法 收集我院RA标本并取非RA标本作为对照.q
目的构建表达蔗糖异构酶PalⅠ的枯草芽孢杆菌B. subtilis WB800重组表达菌,并对其催化蔗糖转化的产物进行分析。方法采用RF-clone方法扩增蔗糖异构酶PalⅠ基因(NCBI:AY040843.1),克隆至pHT43载体,构建重组质粒pHT43-PalⅠ,转化至枯草芽孢杆菌B. subtilis WB800中,构建菌株pHT43-PalⅠ/B. subtilis WB800,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白蔗糖异构酶PalⅠ的表达情况。在含2%、4%、8%、12%蔗糖的培养基中
目的对抗破伤风毒素单克隆抗体细胞培养基进行筛选与优化。方法首先通过评估多种商业无血清培养基中抗破伤风毒素单克隆抗体工程细胞株CHO-K1-G2的生长及代谢参数,筛选出一种进行组分优化的基础培养基;再利用试验设计(Design of Experiments,DOE)的方法从23种培养基添加物中筛选出能够显著促进细胞蛋白表达量的物质;最后用筛选出的基础培养基进行扩大培养,亲和纯化后获得目的蛋白,并对蛋白质性质进行初步分析。结果最终确定2号培养基作为后续优化的基础培养基;6种物质可作为培养基添加物,按照影响作用
黄河流域对维护中国生态安全、促进社会经济发展具有重要的战略地位。基于2000、2005、2010、2015、2020年5期遥感解译数据和经济社会统计数据,测算了黄河流域9省71个市(州、盟)的水域生态系统服务价值,并通过构建生态系统服务与经济发展一致性指数对二者时空协调性进行分析。结果表明:(1)研究时段内,黄河流域水域面积逐年增加,其中上游地区增长最多、增幅较小,下游地区增长较多、增幅最大,中游
鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii, Aba)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, Kpn)等条件致病性革兰氏阴性菌导致的院内感染，给医疗卫生管理和人类生命健康带来极大挑战。多重耐药菌株的播散及细菌毒力的增加亟需新的治疗策略应对。Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion system, T6SS)是多种革兰氏阴性菌编码的一种保守"分泌装置"，
目的探究丹参酮IIA(Tan IIA)对阿尔茨海默症(AD)模型小鼠神经保护作用及对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路的影响。方法采用侧脑室注射脂多糖(LPS)法构建AD小鼠模型,随机分为模型组、Tan IIA低、中及高剂量组,另选取未处理小鼠作为空白组;Tan IIA处理组以腹腔注射进行给药,剂量分别为1、5、10 mg/kg,每天1次,连续给药7周。检测各组小鼠行为学能力(Morris水迷宫实验、Y迷宫及自主活动能力测试),HE染色观察小鼠脑组织病理变化,ELISA检测脑组织匀浆
目的 研究牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea viruses,BVDV)N-端自身蛋白酶(Npro)的生物信息学特征及表达特性.方法 克隆NADL株BVDV Npro基因,利用生物信息学软件分析
目的 本研究旨在观察补肾温阳化瘀方对大鼠肾阳虚血瘀型子宫内膜异位症(Endometriosis,EMs)模型的治疗作用,并以FoxO1介导的细胞自噬为切入点阐明其治疗EMs的可能作用机制.方
目的研究屋尘螨Derp1蛋白的性质,通过在线软件明确CD4~+T细胞和CD8~+T细胞抗原表位分布情况,并找出其优势表位,为尘螨过敏特异诊断和免疫治疗提供新思路和理论依据。方法通过ExPASy的ProtParam tool在线软件输入Derp1蛋白的氨基酸序列分析其理化性质;通过TMpred软件输入Derp1蛋白的氨基酸序列检测该蛋白质的跨膜区特征。经NCBI检索出Derp1基因及其编码氨基酸序列,登录NetMHCIIpan 3.2 Server在线软件输入Derp1基因序列,找出CD4~+T细胞抗原表位