【摘 要】
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目的:利用RNAi(RNA interference,RNA干扰)技术,通过抑制△Np63基因的表达,研究其对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用,同时检测△Np63基因被抑制后对cdk4(细胞周期素依赖
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院泌尿外科,重庆,400016
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目的:利用RNAi(RNA interference,RNA干扰)技术,通过抑制△Np63基因的表达,研究其对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用,同时检测△Np63基因被抑制后对cdk4(细胞周期素依赖性激酶4,cyclin-dependent kinase 4)的影响.方法:建立人膀胱癌裸鼠皮下移植模型,构建△Np63基因特异性shRNA(short hairpin,短发卡)表达质粒,将表达质粒转染荷瘤鼠瘤体,观察肿瘤生长情况,HE染色法观察质粒治疗后瘤组织的病理改变,RT-PCR方法检测△Np63基因的表达变化,SP免疫组化检测△Np63和ckd4蛋白表达变化.结果:转染质粒8周后,△N p63-shRNA组、Control-shRNA组与生理盐水组比较,△Np63-shRNA组与生理盐水组瘤体积有显著性差异(p＜0.01),抑瘤率为74.44%,Control-shRNA组与生理盐水组体积无显著性差异(p＞0.05).病理学结果发现:△Np63-shRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞核分裂相减少,可见大量肿瘤细胞坏死和凋亡、炎症细胞浸润.RT-PCR结果显示△Np63-shRNA组△Np63基因表达降低,免疫组化结果显示△Np63和ckd4蛋白表达均降低.结论:△Np63特异性shRNA质粒表达载体沉默△Np63基因后,可显著抑制人膀胱癌裸鼠肿瘤的生长,△Np63可能通过抑制ckd4的表达而抑制肿瘤的细胞增殖.
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