【摘 要】
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目的：探讨胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的序列拷贝数及拷贝温度、时间与其体外表达水平的关系。方法：首先将以4拷贝数为单位的GLP-1序列插入到p ET-22b（＋）中构建GLP-1多拷贝表达载体,然
【机 构】
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天津医科大学代谢病医院内分泌研究所,协和干细胞基因工程有限公司,天津长和生物技术有限公司
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目的：探讨胰高血糖素样肽-1（GLP-1）的序列拷贝数及拷贝温度、时间与其体外表达水平的关系。方法：首先将以4拷贝数为单位的GLP-1序列插入到p ET-22b（＋）中构建GLP-1多拷贝表达载体,然后将表达载体转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行蛋白体外培养表达。取不同温度和诱导时间段进行蛋白表达,检测GLP-1在不同条件下的蛋白表达量,优化蛋白最适表达条件。结果：GLP-1多拷贝在BL21菌株中的最佳表达温度为26℃,最适诱导时间为8 h。拷贝数与GLP多拷贝表达量呈负相关性,拷贝数越多,蛋白产量越
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