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甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶1（SeCDA1）在毕赤酵母中的表达与活性测定

来源 :中国生物防治学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：luojuncad

【摘 要】

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利用RACE-PCR方法,扩增得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰基酶基因secda1.将secda1基因插入到载体pPIC9K多克隆位点,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到重组质粒pPIC9K-secda1.重

【作 者】

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孙晓彤 赵丹 闫晓平 郭巍 徐大庆 李少雅 李景 

【机 构】

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河北农业大学植物保护学院/河北省农作物病虫害生物防治工程技术中心,河北农业大学生命科学学院,北京农学院植物科学技术学院

【出 处】

：

中国生物防治学报

【发表日期】

：

2015年4期

【关键词】

：

甜菜夜蛾 几丁质脱乙酰酶 毕赤酵母 Spodoptera exigua  chitin deacetylase  Pichia pastoris 

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利用RACE-PCR方法,扩增得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰基酶基因secda1.将secda1基因插入到载体pPIC9K多克隆位点,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,得到重组质粒pPIC9K-secda1.重组质粒经线性化后,电击转化缺陷性毕赤酵母GS115感受态细胞,构建含有目的基因的重组酵母菌株.经甲醇诱导表达,Western blot分析后表明secda1基因在毕赤酵母GS115中成功表达80 kDa蛋白.脱乙酰基酶活性测定结果显示重组蛋白酶活力为1.35 U/mL.利用RT-PCR对该基因进行mR

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