【摘 要】
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构建组织因子表达质粒并转染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,分泌表达有活性的组织因子。用阳离子聚合物法将构建好的转染质粒pIRESneo3-TF1-218转染入SP2/0细胞,经G418抗性筛选后,蛋白
【机 构】
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复旦大学上海医学院分子医学教育部重点实验室;
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构建组织因子表达质粒并转染小鼠骨髓瘤细胞SP2/0,分泌表达有活性的组织因子。用阳离子聚合物法将构建好的转染质粒pIRESneo3-TF1-218转染入SP2/0细胞,经G418抗性筛选后,蛋白可由SP2/0细胞无血清培养分泌表达。G418 800ug/ml筛选到的表达克隆,经无血清培养,可分泌表达,western blot证明其为人组织因子衍生物,Mr为40k,脂化后,具有促凝血活性。成功构建组织因子蛋白表达质粒pIRESneo3-TF1-218,转染细胞可分泌表达有活性的组织因子
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