【摘 要】
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目的构建特殊富含AT序列结合蛋白2 (Satb2)基因慢病毒表达载体并通过感染293T细胞检测目的基因的表达。方法采用PCR技术扩增目的基因Satb2,并在目的基因的上下游分别添加酶切
【机 构】
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陕西省康复医院口腔科,山东大学口腔医学院牙周科山东省口腔生物医学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金(编号:81200790),山东省重点研究开发计划(公益类)(编号:2017GSF218063)
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目的构建特殊富含AT序列结合蛋白2 (Satb2)基因慢病毒表达载体并通过感染293T细胞检测目的基因的表达。方法采用PCR技术扩增目的基因Satb2,并在目的基因的上下游分别添加酶切位点PacⅠ和AscⅠ,将其PCR产物和目的载体用PacⅠ和AscⅠ分别进行双酶切,通过T4DNA ligase连接酶切后的PCR产物及目的载体,构建pLenti6.3-Satb2-IRES-EGFP慢病毒表达载体,通过菌液PCR、酶切及测序鉴定其结果;将阳性克隆质粒与包装质粒Mix共转染293T细胞,收集、浓缩病毒液并测定
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