【摘 要】
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目的:观察Sox9基因对人脂肪干细胞(ADSCs)的诱导作用。方法:分离、纯化、培养人源ADSCs,并绘制生长曲线,传代三次后的ADSCs利用脂质体转染Sox9基因,选用抗生素G418进行筛选。
【机 构】
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第三军医大学大坪医院心血管内科心功能室; 第三军医大学西南医院急诊科; 成都军区昆明总医院骨科;
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目的:观察Sox9基因对人脂肪干细胞(ADSCs)的诱导作用。方法:分离、纯化、培养人源ADSCs,并绘制生长曲线,传代三次后的ADSCs利用脂质体转染Sox9基因,选用抗生素G418进行筛选。以空载体转染细胞作对照,分别取48h和14d转染后的细胞做Flag蛋白免疫组织化学鉴定。通过检测转染细胞中II型胶原来确定ADSCs是否向软骨细胞分化。结果:ADSCs呈长梭形,形态与骨髓间充质干细胞相似,600μg/mlG418为最适筛选浓度。转染后第48h和14d的细胞均能表达Sox9基因融合表达的Flag蛋白。第48h和14d,转染效率分别为93%和75%。转染后14d的ADSCs表达II型胶原,转染后48h实验组和对照组都为阴性。结论:Sox9基因能诱导脂肪干细胞向软骨细胞分化。
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