【摘 要】
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目的 探讨塞来昔布联合三氧化二砷( As2O3)对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞bcr-abl融合基因mRNA表达、bcr-abl蛋白即p210蛋白表达、蛋白质酪氨激酶(PTK)活性以及对下游增殖
【机 构】
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223300,南京医科大学附属淮安第一医院血液科223300,南京医科大学附属淮安第一医院感染科;223300,南京医科大学附属淮安第一医院中心实验室;
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目的 探讨塞来昔布联合三氧化二砷( As2O3)对慢性粒细胞白血病(CML)原代细胞bcr-abl融合基因mRNA表达、bcr-abl蛋白即p210蛋白表达、蛋白质酪氨激酶(PTK)活性以及对下游增殖信号转导途径的影响.方法 用塞来昔布(40 μmol/L)、As2O3(2μmol/L)单独以及二者联合干预CML患者骨髓单个核细胞36 h,进行实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)、Western印迹和PTK活性检测,分析bcr-abl融合基因mRNA的表达、p210蛋白表达以及PTK活性的变化,以Western印迹检测STAT1、STAT5、磷酸化STAT1( p-STAT1)、磷酸化STAT5( p-STAT5)以及ID1的表达变化.结果 RQ-RT-PCR结果显示,对照组、塞来昔布组、As2O3组和塞来昔布联合As2O3组的mRNA水平分别为(5.97±0.53)％、(5.74±0.46)％、(5.94±0.57)％和(3.06±0.41)％,仅塞来昔布联合As2O3组与对照组的比较差异有统计学意义(t=28.35,P=0.00).p210蛋白表达量化分析显示,塞来昔布与As2O3均可下调p210蛋白,而塞来昔布联合As2O3则显著下调p210蛋白.PTK活性检测显示,对照组、塞来昔布组、As2O3组和塞来昔布联合As2O3组吸光度(A450)值分别为1.17±0.11、1.14±0.19、1.16±0.21和0.83±0.15,塞来昔布联合As2O3组与对照组比较差异有统计学意义(t=4.38,P=0.04).Westem印迹检测显示,塞来昔布联合As2O3可更显著下调STAT1、STAT5、p-STAT1、p-STAT5和ID1蛋白表达.结论 塞来昔布联合As2O3对下调CML原代细胞bcr-abl mRNA和蛋白表达、抑制PTK活性、抑制STAT及ID1信号转导通路具有协同作用.
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