随机化CDR3抗体库的构建及不经免疫制备抗体的初步探索

来源 :中华微生物学和免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luzihao009
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为探索利用噬菌体抗体库技术不经免疫制备抗体,在已有的抗乙肝病毒表面抗原(HBs)人Fab段基因的基础上,通过PCR引入突变,对其VH CDR3中12个氨基酸残基(95~100J)进行了完全随机化,对94和100K位残基进行了有限随机化,构建了半合成噬菌体抗体库,库容为2×108,58%含有随机化CDR3序列,用无关抗原小鼠IgG对该抗体库进行筛选,获得了三个可与小鼠IgG结合而不与HBs反应的克隆,经测定其CDR3的DNA序列,发现这三个克隆具有相同的CDR3,证明单纯改变VH CDR3可以得到新的特异性抗体,从而绕过免疫制备抗体。

其他文献
摘 要:目的:通过女贞子提取物对大强度耐力训练大鼠不同组织一氧化氮(NO)含量与总一氧化氮合酶(T-NOS)活性的影响,探讨女贞子提取物对大鼠运动能力的作用机制。方法:24只SD大鼠随机分为安静对照组、运动对照组和运动加药组,每组8只。测定不同组织一氧化氮含量和总一氧化氮合酶的活性。结果:运动对照组和运动加药组大鼠各组织NO含量均显著高于安静对照组(P<0.01),运动加药组大鼠不同组织NO含量显