节杆菌BT801基因文库构建及其乙内酰脲酶基因分离与表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：carjitar

【摘要】

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L-乙内酰脲酶产生菌节杆菌 BT801的染色体DNA经Sau3A I 部分酶切后分离30kb左右的片段,与经HpaI和PstI酶切的黏粒载体pKC505进行连接,将连接产物用包装蛋白包装,转染大肠杆菌

【作者】

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郝淑凤张惟材袁红杰王恒梁黄留玉

【机构】

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军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

：

2003年3期

【关键词】

：

乙内酰脲酶节杆菌基因文库基因表达 hydantoinase Arthrobacter gene library gene expression

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L-乙内酰脲酶产生菌节杆菌 BT801的染色体DNA经Sau3A I 部分酶切后分离30kb左右的片段,与经HpaI和PstI酶切的黏粒载体pKC505进行连接,将连接产物用包装蛋白包装,转染大肠杆菌DH5α得到10 000多个转化子,构建成节杆菌BT801的基因组文库.通过薄层层析等方法筛选得到了1个阳性克隆,通过亚克隆得到了乙内酰脲酶的完整基因,该基因能分别利用自身的启动子和T5启动子在大肠杆菌中进行表达产生有活性的蛋白.

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