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目的
探讨槲皮素对凝血酶诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和迁移的影响及其机制。
方法取第3~5代体外培养的大鼠胸主动脉VSMC,分为对照组(在DMEM培养基中加入磷酸盐缓冲液)、凝血酶组(在DMEM培养基中加入1 U/ml凝血酶)和槲皮素组(在DMEM培养基中先加入1 U/ml凝血酶刺激后,再加入100 μmol/L槲皮素)。采用CCK-8法检测细胞的增殖能力;Transwell小室法检测细胞的迁移能力;Western blot法检测磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(ERK 1/2)和磷酸化p38蛋白的表达水平。
结果(1)CCK-8法检测显示,凝血酶组的吸光度值高于对照组(2.59±0.16比1.97±0.18,P<0.01);槲皮素组的吸光度值(2.13±0.19)低于凝血酶组(P<0.01);槲皮素组与对照组的吸光度值差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Transwell小室法检测显示,凝血酶组VSMC的迁移细胞数多于对照组[(1 337±162)个比(99±26)个,P<0.01];槲皮素组VSMC的迁移细胞数为(926±111)个,少于凝血酶组(P<0.05);槲皮素组VSMC的迁移细胞数多于对照组(P<0.01)。(3)凝血酶组的磷酸化ERK 1/2和磷酸化p38蛋白表达水平均高于对照组(P均<0.05);槲皮素组的磷酸化ERK 1/2和磷酸化p38蛋白表达水平均低于凝血酶组(P均<0.05);槲皮素组与对照组的磷酸化ERK 1/2和磷酸化p38蛋白表达水平差异无统计学意义(P均>0.05)。
结论槲皮素可抑制凝血酶诱导的大鼠VSMC增殖和迁移,其机制可能与抑制ERK 1/2和p38磷酸化有关。