【摘 要】
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为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中PrP~C的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes,并利用电镜技
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为探求人外周血单核细胞是否分泌exosomes以及exosomes的分泌与细胞外环境中PrP~C的关系。采用密度梯度离心的方法从人外周血单核细胞系的培养基中提取exosomes,并利用电镜技术和免疫印迹分析对其形态学和生物学特征进行鉴定。结果显示所提取的exosomes主要分布在1.13~1.16 g/ml的密度层中,平均直径在30~100 nm之间,呈杯状,这与相关报道关于其他细胞分泌的exosomes特征分析的结果相一致;与exosomes相关的分子Tsg101、flotillin-1、Hsp70、PrP~C均为阳性标记,而作为内质网标志蛋白的钙连接蛋白在exosomes上没有检测到。以上结果说明人外周血单核细胞分泌的exosomes没有被细胞器污染,而且细胞向培养基中释放PrP~C与其分泌exosomes有关。
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