【摘 要】
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取临床分离的 1 3株氧氟沙星 ( OFL)耐药菌 ,提取其质粒 DNA,经纯化后作为模板 ,用 PCR扩增 gyr A基因喹诺酮耐药决定区 ( QRDR) ;PCR阳性质粒的菌株 ,再扩增其染色体 gyr A
【机 构】
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解放军军需大学动物科技系!吉林长春130062; 新疆塔里木农垦?;
【基金项目】
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吉林省自然科学基金!资助项目 ( 980 2 13 )
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取临床分离的 1 3株氧氟沙星 ( OFL)耐药菌 ,提取其质粒 DNA,经纯化后作为模板 ,用 PCR扩增 gyr A基因喹诺酮耐药决定区 ( QRDR) ;PCR阳性质粒的菌株 ,再扩增其染色体 gyr A基因 QRDR,直接测定质粒和染色体 DNA扩增产物序列并进行分析。只有 CE0 1菌株的质粒 DNA和染色体 DNA可扩增出长度为 668bp的 PCR产物片段 ,两者基因序列相同率为 98.1 7% ,相同位点突变相同的碱基有 5个 ,相同位点突变不同的碱基有 2个。与基因数据库中的大肠杆菌 gyr A基因相应序列比较 ,该菌质粒 DNA PCR产物同源率为97.80 % ,有 1 3个位点发生突变 ,3个氨基酸被替换 ;染色体 DNA PCR产物同源率 98.0 0 % ,有 1 2个位点发生突变 ,2个氨基酸被替换 ;都包括了国外资料报道的突变率较高的第 83位氨基酸的突变。结果表明 ,该菌株质粒和染色体上都存在喹诺酮耐药基因 ,对 OFL的耐药可能是质粒诱导和染色体突变共同作用的结果
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