【摘 要】
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目的 :探讨用于PCR扩增产物快速高效的克隆技术。方法 :为制备T载体 ,用SmaI消化质粒 pUC18成纯末端 ,纯化后与TaqDNA聚合酶及dTTP ,75℃反应 2h ,构建成加上T尾的线性 pUC18
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目的 :探讨用于PCR扩增产物快速高效的克隆技术。方法 :为制备T载体 ,用SmaI消化质粒 pUC18成纯末端 ,纯化后与TaqDNA聚合酶及dTTP ,75℃反应 2h ,构建成加上T尾的线性 pUC18载体。将由质粒 pBR32 2 HPV16中PCR扩增获得早期蛋白E6的基因扩增产物 ,根据TA克隆策略克隆至pUC18 T载体中 ,经PCR、限制性酶切分析鉴定重组子 ,并对TA克隆连接条件做了探讨。 结果 :获得重组质粒 pUC18 E6。 结论 :TA克隆采用低温延时连接 ,阳性克隆率高 ,是高效、快速的PCR产物克隆
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