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摘要：目的：比较间接免疫荧光法和胶体金标记免疫斑点法在检测儿童肺炎支原体（MP）IgM抗体的临床应用价值。方法：采用间接免疫荧光法和用胶体金标记免疫斑点法和分别对359例患儿血清进行MP抗体的检测。结果：间接免疫荧光法和用胶体金标记免疫斑点法的检测阳性率分别为60.2%，35.1%。结论：两种方法均可用于肺炎支原体IgM的实验室检测,间接免疫荧光法灵敏度高于胶体金法；胶体金标记免疫斑点法检测时间较短。
关键词：儿童肺炎支原体胶体金法间接免疫荧光法
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.08.612【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2014)08-0371-01
肺炎支原体是能够独立生活的最小的病原微生物,是兒童时期肺炎和其他呼吸道感染的重要病原体之一。实验室检测到肺炎支原体抗体（MP-IgM）是临床确诊肺炎支原体感染的重要依据[1]。由于MP缺乏细胞壁，仅对大环内酯类、四环素类等抗生素类较为敏感，因此快速、简便、准确的检测到MP-IgM，对儿童肺炎支原体感染的治疗具有重要意义[2]。本研究通过对我院2013年8月-2014年1月共359份疑似MP感染患儿的血清标本用两种方法进行了平行检测,探讨他们在临床诊断中的应用价值。现将结果报告如下:
1资料于方法
1.1标本来源。标本采集自我院2013年8月-2014年1月门诊及住院的急性上呼吸道感染患儿共359例,其中男性206例,女性153例.年龄为2个月-11岁。
1.2商品试剂盒。肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒(胶体金标记免疫斑点法)购自福建省明溪海天蓝波生物技术有限公司,肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法)购自郑州安图生物工程股份有限公司，所有试剂均在有效期内使用。
1.3方法。
1.3.1胶体金法:取患儿1-2ml血液经3000r/min离心10min后分离出血清,进行检测,按说明书操作,反应孔中显现红色质控线和红色圆斑为阳性,反应孔中只显现红色质控线为阴性,反应孔中未显现红色质控线需重新测试
1.3.2间接免疫荧光法:取患儿1-2ml血液经3000r/min离心10min后分离血清,按说明书操作,支原体对阳性血清在细胞外围呈现苹果绿色荧光
2结果
359例患儿中胶体金标记免疫斑点法阳性126例,阳性率为35.10%.间接免疫荧光法中阳性216例,阳性率为60.20%，其中两者同为阳性的为93例占25.9%。
3讨论
肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见.肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮内潜伏,部分患儿无明显症状,但大部分患者为显性感染,鉴于肺炎支原体感染的临床症状不明显,X射线征象缺乏特异性,临床须借助实验室检查才能予以确诊[3]。目前,肺炎支原体的实验室检查主要依靠血清学方法,肺炎支原体血清抗体的检测主要是IgM[4]。由于肺炎支原体肺炎的潜伏期14-21天,起病缓慢,IgM抗体一般在感染后1周出现3-4周达高峰,可持续存在3-6个月.因此但当患儿出现症状就诊时血清中IgM水平已经很高,足以用于临床检测[5]。
胶体金标记免疫斑点法是利用MP-P1蛋白作为抗原检测相应的抗体,是目前诊断肺炎支原体感染的可靠方法,且其实验过程操作简单，反应时间短，结果易于判断[6,7]。间接免疫荧光法是新近发展起来的一种检测IgM抗体的方法,该方法可以在显微镜下看见抗原抗体反应后的荧光现象，方法学上较为敏感[8]。本研究中间接免疫荧光法的阳性率60.2%，高于胶体金标记免疫斑点法的阳性率35.1%。但是间接免疫荧光法的操作步骤较为复杂，检测所需时间较长，判断结果需要一定的经验。
综上所述，间接免疫荧光法和胶体金标记免疫斑点法在临床应用中各有优缺点。间接免疫荧光法在诊断肺炎支原体感染中灵敏度更高，但是由于操作步骤复杂，检测时间较长，且判断结果需要一定的经验，因此其更适合临床住院病人检测应用；胶体金标记免疫斑点法虽然灵敏度低，但是由于其检测时间短，操作简便，结果易于判断，因此其更适合门诊快速诊断使用。参考文献
[1]刘俊峰,苏丹,冯素花,等.317例儿童肺炎支原体感染检验结果分析[J].检验医学与临床,2011,8(16);1948-1949
[2]何友华,姚庆完.6795例呼吸道感染患者肺炎支原体抗体检测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2012,18(1):43-44
[3]赵阅,孙红妹.肺炎支原体实验诊断技术现状及发展[J].国际呼吸杂志,2009,29(5):304-308
[4]Wu LX,Wu M,Gu DP.Pulmonary functions in children with segmental Mycoplasma pneumoniae pneumonia [J].Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi,2011,13(3):185-187
[5]Xu D,Li S,Chen Z,et al.Detection of Mycoplasma pneumoniae in different respiratory specimens [J].Eur J Pediatr,2011,170(7):851-858
[6]刘剑荣,张勇,陈玲.小儿肺炎1224例肺炎支原体抗体检测结果[J].临床和实验医学杂志,2010,9(1):54-55.
[7]崔奕文,刘毅,林梅.肺炎支原体IgM抗体检测的常用方法比较[J].国际检验医学杂志,2011,32(10);1107-1108
[8]张利通,连建谦,刘俐,等.肺炎支原体抗体检测阳性率存在差异的原因分析[J].临床和实验医学杂志,2007,6(3):129
关键词：儿童肺炎支原体胶体金法间接免疫荧光法
Doi:10.3969/j.issn.1671-8801.2014.08.612【中图分类号】R9【文献标识码】B【文章编号】1671-8801(2014)08-0371-01
肺炎支原体是能够独立生活的最小的病原微生物,是兒童时期肺炎和其他呼吸道感染的重要病原体之一。实验室检测到肺炎支原体抗体（MP-IgM）是临床确诊肺炎支原体感染的重要依据[1]。由于MP缺乏细胞壁，仅对大环内酯类、四环素类等抗生素类较为敏感，因此快速、简便、准确的检测到MP-IgM，对儿童肺炎支原体感染的治疗具有重要意义[2]。本研究通过对我院2013年8月-2014年1月共359份疑似MP感染患儿的血清标本用两种方法进行了平行检测,探讨他们在临床诊断中的应用价值。现将结果报告如下:
1资料于方法
1.1标本来源。标本采集自我院2013年8月-2014年1月门诊及住院的急性上呼吸道感染患儿共359例,其中男性206例,女性153例.年龄为2个月-11岁。
1.2商品试剂盒。肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒(胶体金标记免疫斑点法)购自福建省明溪海天蓝波生物技术有限公司,肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒(间接免疫荧光法)购自郑州安图生物工程股份有限公司，所有试剂均在有效期内使用。
1.3方法。
1.3.1胶体金法:取患儿1-2ml血液经3000r/min离心10min后分离出血清,进行检测,按说明书操作,反应孔中显现红色质控线和红色圆斑为阳性,反应孔中只显现红色质控线为阴性,反应孔中未显现红色质控线需重新测试
1.3.2间接免疫荧光法:取患儿1-2ml血液经3000r/min离心10min后分离血清,按说明书操作,支原体对阳性血清在细胞外围呈现苹果绿色荧光
2结果
359例患儿中胶体金标记免疫斑点法阳性126例,阳性率为35.10%.间接免疫荧光法中阳性216例,阳性率为60.20%，其中两者同为阳性的为93例占25.9%。
3讨论
肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见.肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮内潜伏,部分患儿无明显症状,但大部分患者为显性感染,鉴于肺炎支原体感染的临床症状不明显,X射线征象缺乏特异性,临床须借助实验室检查才能予以确诊[3]。目前,肺炎支原体的实验室检查主要依靠血清学方法,肺炎支原体血清抗体的检测主要是IgM[4]。由于肺炎支原体肺炎的潜伏期14-21天,起病缓慢,IgM抗体一般在感染后1周出现3-4周达高峰,可持续存在3-6个月.因此但当患儿出现症状就诊时血清中IgM水平已经很高,足以用于临床检测[5]。
胶体金标记免疫斑点法是利用MP-P1蛋白作为抗原检测相应的抗体,是目前诊断肺炎支原体感染的可靠方法,且其实验过程操作简单，反应时间短，结果易于判断[6,7]。间接免疫荧光法是新近发展起来的一种检测IgM抗体的方法,该方法可以在显微镜下看见抗原抗体反应后的荧光现象，方法学上较为敏感[8]。本研究中间接免疫荧光法的阳性率60.2%，高于胶体金标记免疫斑点法的阳性率35.1%。但是间接免疫荧光法的操作步骤较为复杂，检测所需时间较长，判断结果需要一定的经验。
综上所述，间接免疫荧光法和胶体金标记免疫斑点法在临床应用中各有优缺点。间接免疫荧光法在诊断肺炎支原体感染中灵敏度更高，但是由于操作步骤复杂，检测时间较长，且判断结果需要一定的经验，因此其更适合临床住院病人检测应用；胶体金标记免疫斑点法虽然灵敏度低，但是由于其检测时间短，操作简便，结果易于判断，因此其更适合门诊快速诊断使用。参考文献
[1]刘俊峰,苏丹,冯素花,等.317例儿童肺炎支原体感染检验结果分析[J].检验医学与临床,2011,8(16);1948-1949
[2]何友华,姚庆完.6795例呼吸道感染患者肺炎支原体抗体检测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2012,18(1):43-44
[3]赵阅,孙红妹.肺炎支原体实验诊断技术现状及发展[J].国际呼吸杂志,2009,29(5):304-308
[4]Wu LX,Wu M,Gu DP.Pulmonary functions in children with segmental Mycoplasma pneumoniae pneumonia [J].Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi,2011,13(3):185-187
[5]Xu D,Li S,Chen Z,et al.Detection of Mycoplasma pneumoniae in different respiratory specimens [J].Eur J Pediatr,2011,170(7):851-858
[6]刘剑荣,张勇,陈玲.小儿肺炎1224例肺炎支原体抗体检测结果[J].临床和实验医学杂志,2010,9(1):54-55.
[7]崔奕文,刘毅,林梅.肺炎支原体IgM抗体检测的常用方法比较[J].国际检验医学杂志,2011,32(10);1107-1108
[8]张利通,连建谦,刘俐,等.肺炎支原体抗体检测阳性率存在差异的原因分析[J].临床和实验医学杂志,2007,6(3):129