UPLC-MS/MS法同时测定不同基原藏黄堇中3种生物碱的含量

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目的 建立并应用同时测定不同基原藏黄堇中荷包牡丹碱、原阿片碱、黄连碱含量的方法,为该类药材的基原确定和质量控制提供参考依据。方法 采用超高效液相色谱-三重四极杆质谱联用(UPLC-MS/MS)法:色谱柱为Agilent EC-C18(100 mm×2.1mm,2.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,柱温为35℃。采用电喷雾离子源正离子模式检测,多反应监测扫描。结果 荷包牡丹碱、原阿片碱、黄连碱的进样质量浓度分别在5.88~117.60、53.70~1 074.00、4.85~97.00 ng/mL之间与各自峰面积成良好的线性关系(r分别为0.998 2、0.991 9、0.999 6);定量限分别为2.35、1.07、1.46 ng/mL,检测限分别为1.17、0.54、0.49 ng/mL;精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均未超过2.0%;平均加样回收率分别为97.41%、98.89%、105.44%(RSD均小于5.0%,n=6)。结论 所建立的方法选择性好、准确度高,适用紫堇属植物中荷包牡丹碱、原阿片碱和黄连碱的快速分析。3种生物碱总量在不同基原药材中的含量从高到低依次为金球黄堇、尖突黄堇、矮黄堇、尼泊尔黄堇和斑花黄堇,其中金球黄堇和尖突黄堇中的生物碱含量比较接近,但斑花黄堇和尼泊尔黄堇中未检测到荷包牡丹碱。
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