【摘 要】
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本研究旨在观察斯氏艾美耳球虫裂殖生殖阶段特异性表面抗原Es-SAG13和Es-SAG14的原核表达产物对兔的免疫保护效果.利用相对荧光定量PCR分析Es-SAGs在未孢子化卵囊时期、孢子化卵囊时期、裂殖生殖时期和配子生殖时期的转录水平,并对裂殖生殖阶段特异性表达的Es-SAG进行原核表达;然后将40只45日龄无球虫幼兔随机分为4组,分别是空白对照组、攻虫对照组、rEs-SAG13免疫组和rEs-SAG14免疫组,分别经颈部皮下注射 1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL(100 μg·mL-1)rE
【机 构】
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四川农业大学动物医学院,成都611130;四川省畜牧科学研究院,成都610066;动物遗传育种四川省重点实验室,成都610066
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本研究旨在观察斯氏艾美耳球虫裂殖生殖阶段特异性表面抗原Es-SAG13和Es-SAG14的原核表达产物对兔的免疫保护效果.利用相对荧光定量PCR分析Es-SAGs在未孢子化卵囊时期、孢子化卵囊时期、裂殖生殖时期和配子生殖时期的转录水平,并对裂殖生殖阶段特异性表达的Es-SAG进行原核表达;然后将40只45日龄无球虫幼兔随机分为4组,分别是空白对照组、攻虫对照组、rEs-SAG13免疫组和rEs-SAG14免疫组,分别经颈部皮下注射 1 mL PBS、1 mL PBS、1 mL(100 μg·mL-1)rEs-SAG13、1 mL(100 μg·mL-1)rEs-SAG14,首免 14 d 后,同等剂量加强免疫,二免14 d后,除空白对照外经口感染1×104个斯氏艾美耳球虫孢子化卵囊·只 1,观察各组临床症状并于感染21 d后剖检,并统计各组的卵囊排出量、相对增重、料肉比、肝指数和肝病变记分.结果显示:Es-SAGs在各阶段的转录水平存在差异,其中,SAG13、SAG14属于裂殖生殖阶段特异表达的成员,原核表达的rEs-SAG13和rEs-SAG14均具有良好的反应原性.免疫保护试验表明:感染后攻虫对照组出现兔肝球虫病典型症状,而免疫组症状不明显;rEs-SAG13免疫组和rEs-SAG14免疫组的卵囊减少率分别达82.8％和51.9％;免疫组平均相对增重均显著大于攻虫对照组(P＜0.05);rEs-SAG13免疫组与攻虫对照组的肝指数、肝病变记分差异均显著(P＜0.05),而rEs-SAG14免疫组与攻虫对照组的肝指数、肝病变记分差异均不明显(P＞0.05).rEs-SAG13和rEs-SAG14均能不同程度地减少增重损失和卵囊排出,减轻肝病变,其中rEs-SAG13免疫保护效果更佳.
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