目的建立大鼠口服及静脉注射3-正丁基苯酞（NBP）的药动学研究方法。方法以雄性Wistar大鼠为实验对象,分别采取静脉注射和口服给药2种方式,于给药后不同时间点取血,采用高效液相反相色谱检测法（RP-HPLC）测定大鼠血浆中NBP的含量,选用Hypersil ODS色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以0.05 mol·L^-1醋酸钠溶液-乙睛（50:50,V/V）为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为228 nm。应用3P97药动学软件处理血药浓度数据,获得药动学参数。结果 NBP在0.050 38～21.23μg·mL^-1（r=0.999 7）范围内线性关系良好,其中定量下限为0.050 38μg·mL^-1;日内和日间精密度均小于4.8%,低、中、高浓度的NBP提取回收率均在80%以上。NBP药动学过程符合双隔室开放模型。大鼠静脉注射NBP 5、10、20 mg·kg^-1的主要药动学参数分别为t_1/2（2.67±0.72）h、（2.23±0.92）h、（2.27±0.52）h;AUCo_0-t（8.15±1.46）mg·h·L^-1、（7.23±1.55）mg·h·L^-1、（14.05±1.67）mg·h·L^-1。口服60、240和360 mg·kg^-1NBP的主要药动学参数依次为P_max（2.90±0.94）μg·mL^-1、（5.46±0.56）μg·mL^-1、（9.46±1.61）μg·mL^-1;AUC_0-t（7.11±2.90）mg·h·L^-1、（14.00±0.82）mg·h·L^-1、（24.33±2.86）mg·h·L^-1。结论本法灵敏度高、专属性强、易操作,结果准确可靠,可用于NBP的药动学研究。