【摘 要】
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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)是糖异生途径的关键酶,当动植物处于温度胁迫等不良环境条件时,它可通过催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,继而生成葡萄糖以维持机体的血糖平衡,在抗逆过程中起着重要作用.本研究鉴定了马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)的PEPCK基因(PmPEPCK),分析了低温胁迫下PmPEPCK表达量的变化,筛选和比较分析了马氏珠母贝耐低温选育系(low tem-perature resis
【机 构】
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广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;南方海洋科学与工程广东省实验室,广东湛江524025;广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;广东省珍珠科技创新中心,广东湛江524088
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磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK)是糖异生途径的关键酶,当动植物处于温度胁迫等不良环境条件时,它可通过催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,继而生成葡萄糖以维持机体的血糖平衡,在抗逆过程中起着重要作用.本研究鉴定了马氏珠母贝(Pinctada fucata martensii)的PEPCK基因(PmPEPCK),分析了低温胁迫下PmPEPCK表达量的变化,筛选和比较分析了马氏珠母贝耐低温选育系(low tem-perature resistant line,R)F3和北部湾野生群体(Beibu Gulf wild population,W)的 PmPEPCK 外显子区的 SNP 位点.序列分析表明,PmPEPCK基因全长2557 bp,5\'UTR和3\'UTR分别为56 bp和446 bp,开放阅读框2055 bp,编码684个氨基酸.PmPEPCK在所检测组织中均有表达,其中肝胰腺表达量最高(P<0.05).低温胁迫后鳃组织中的时序表达结果显示,低温组(12℃、17℃)PmPEPCK的表达量在6 h达到最高,显著高于22℃对照组(P<0.05),说明PmPEPCK参与贝体的低温响应过程.对PmPEPCK的外显子区SNP进行分析,共得到108个SNP,其中47个SNP位点的基因型频率在R和W群体间差异显著(P<0.05),仅在R中被检测到的基因型有11个,分别是位点g.60010420、g.60007411、g.60011365的基因型 AG,位点 g.60006265、g.60006166的基因型 AA,位点 g.60007389、g.60011387的基因型 CT 和 g.60009449、g.60006028的基因型 TT,位点 g.60011341 的基因型 GG 和 g.60009464的基因型GT.结论认为经过3代选育后,R群体的PmPEPCK基因受到了强烈的正选择,PmPEPCK的这些SNPs及其基因型可能与选育系的低温耐受能力相关,并可能作为选择育种的候选标记.
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