探讨感染期子宫颈癌U14细胞荷瘤小鼠巨噬细胞分泌CC型趋化因子配体5 （CCL5）受到抑制的机制。
方法取6~8周龄的雌性C57BL/6小鼠随机（采用随机数字表法）分为4组，每组6只。无瘤组：皮下注射DMEM培养基；荷瘤组：皮下注射子宫颈癌细胞系U14细胞；无瘤+脂多糖（LPS；用于诱导小鼠感染）组：皮下注射DMEM培养基，腹腔内注射LPS；荷瘤+LPS组：皮下注射U14细胞，腹腔内注射LPS。（1）采用ELISA法及荧光定量PCR技术检测各组小鼠血清及巨噬细胞中CCL5和前列腺素E2（PGE2）的表达。（2）提取各组荷瘤小鼠血清制备肿瘤条件培养基（TCM），体外诱导巨噬细胞，检测诱导前、后各组上清液和巨噬细胞中CCL5、PGE2和环磷酸腺苷（cAMP）的表达。（3）荷瘤+LPS组选用环氧合酶2（COX-2）抑制剂––NS398阻断PGE2的产生（即荷瘤+LPS+NS398组），蛋白激酶A（PKA）阻滞剂––H89阻断cAMP/PKA信号通路（即荷瘤+LPS+H89组），分别制备TCM并检测两组上清液和巨噬细胞中CCL5、PGE2和cAMP的表达。
结果（1）荷瘤组小鼠血清中CCL5蛋白含量及巨噬细胞中CCL5 mRNA的表达水平［分别为（151±35）pg/ml、1.0］均明显低于无瘤组［分别为（691± 85）pg/ml、4.5±0.8；P<0.05］；其血清中PGE2蛋白含量及巨噬细胞中PGE2 mRNA的表达水平［分别为（1 198±83）pg/ml、5.8±0.8］均明显高于无瘤组［分别为（187±25）pg/ml、1.0；P<0.05］。无瘤+LPS组小鼠血清中CCL5蛋白含量及巨噬细胞中CCL5 mRNA的表达水平［分别为（4 049±141）pg/ml、31.5±2.0］均高于明显高于荷瘤+LPS组［分别为（1 951±71）pg/ml、12.1±2.8；P<0.05］；其血清中PGE2蛋白含量及巨噬细胞中PGE2 mRNA的表达水平［分别为（676±70）pg/ml、3.4±0.4］均低于荷瘤+LPS组［分别为（2 550±382）pg/ml、11.6±0.9；P<0.05］。（2）各组小鼠血清制备的TCM在体外培养巨噬细胞后，荷瘤组上清液中CCL5、PGE2、cAMP蛋白含量［分别为（1 626±177）、（790±156）、（164±30）pg/ml］及巨噬细胞中CCL5、PGE2、cAMP mRNA的表达水平（分别为28.6±1.2、1.7±0.3、1.6±0.3）均明显高于无瘤组［其蛋白含量分别为（27±3）、（448±115）、（118±25）pg/ml，其mRNA的表达水平均为1.0；P<0.05］。无瘤+LPS组上清液中CCL5蛋白含量及巨噬细胞中CCL5 mRNA的表达水平［分别为（10 475±742）pg/ml、 212.0±5.7］均明显高于荷瘤+LPS组［分别为（6 375±530）pg/ml、142.3±2.5；P<0.05］；无瘤+LPS组上清液中PGE2、cAMP蛋白含量［分别为（2 438±95）、（340±13）pg/ml］及巨噬细胞中PGE2、cAMP mRNA的表达水平（分别为4.3±0.7、4.1±0.4）均明显低于荷瘤+LPS组［其蛋白含量分别为（3 441±163）、（542± 42）pg/ml，其mRNA的表达水分别为5.9±0.3、5.4±0.5；P<0.05］。（3）与荷瘤+LPS组比较，荷瘤+LPS+NS398组上清液中CCL5蛋白含量及巨噬细胞中CCL5 mRNA的表达水平［分别为（7 691±269）pg/ml、 159.0±8.9］明显升高（P<0.05），而上清液中PGE2、cAMP蛋白含量及巨噬细胞中PGE2、cAMP mRNA的表达水平均明显降低（P<0.05）；荷瘤+LPS+H89组上清液中CCL5蛋白含量及巨噬细胞中CCL5 mRNA的表达水平［分别为（8 375±520）pg/ml、177.0±8.8］进一步升高（P<0.05），而上清液中PGE2、cAMP蛋白含量及巨噬细胞中PGE2、cAMP mRNA的表达水平均进一步降低（P<0.05）。
结论感染期子宫颈癌U14细胞荷瘤小鼠血清可在体外抑制巨噬细胞分泌CCL5，这种抑制效应可能是通过cAMP/PKA通路而受PGE2的调控。