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目的优化核苷磷酸化酶的固定化工艺，并对固定化酶的性质进行研究。方法通过正交试验优化核苷磷酸化酶（包括嘌呤和嘧啶核苷磷酸化酶）固定化条件，并进一步对固定化核苷磷酸化酶的最适pH、温度及其稳定性进行研究。结果固定化酶条件为pH=8．0，温度为25℃，蛋白载量为20mg／g载体，固定化时间为6h；固定化核苷磷酸化酶的最适pH=7．5，最适温度为40℃，固酶连续使用20批次酶活力无明显损失。结论固定化核苷磷酸化酶稳定可靠，适合应用于工业化生产。