猕猴桃模板DNA的提取及RAPD—PCR最佳反应体系的建立

来源 :生物技术通报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sven1989

【摘要】

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以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA,优化了PCR热循环参数,建立了RAPD-PCR扩增的最佳反应体系.实验结果表明,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大,其最适浓度

【作者】

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陈万秋李思光罗玉萍陈少风

【机构】

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南昌大学生物科学工程系

【出处】

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生物技术通报

【发表日期】

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2003年3期

【关键词】

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猕猴桃模板DNA 提取 RAPD-PCR 最佳反应体系 Actinidia RAPD-PCR DNA extraction

【基金项目】

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国家自然科学基金，江西省自然科学基金

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以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA,优化了PCR热循环参数,建立了RAPD-PCR扩增的最佳反应体系.实验结果表明,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大,其最适浓度为80mmol/L;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会影响扩增效果.PCR热循环参数为:94℃预变性5min;94℃变性1min,37℃退火1 min,72℃延伸2min,循环40次;最后在72℃延伸6min.

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