【摘 要】
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为深入研究塞内卡病毒A的病原学及流行病学,本研究分离获得了1株塞内卡病毒A的重庆地区毒株并将其命名为SVA-XN2021。针对VP1基因,设计了1对特异性引物,将SVA-XN2021株编码区克隆入载体pcDNA3.1( ),构建了以重组标准阳性质粒pcDNA3.1( )-SVA为模板的SVA的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,本研究建立的荧光
【机 构】
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西南大学动物医学院,四川省畜牧科学研究院
【基金项目】
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重庆市基础前沿面上项目(cstc2020jcyj-msxm1458),重庆市社会民生类重点研发项目(cstc2018jscx-mszdX0076),中央高校基本科研业务费专项资金重点项目(XDJK2019B045)
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为深入研究塞内卡病毒A的病原学及流行病学,本研究分离获得了1株塞内卡病毒A的重庆地区毒株并将其命名为SVA-XN2021。针对VP1基因,设计了1对特异性引物,将SVA-XN2021株编码区克隆入载体pcDNA3.1( ),构建了以重组标准阳性质粒pcDNA3.1( )-SVA为模板的SVA的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,本研究建立的荧光定量PCR检测方法的Ct值与标准品模板在1.0×101~1.0×106copies/μL的范围内线性关系良好,相关系数为0.9948。且用该方法对PEDV、TGEV、PDCoV等猪常见的腹泻病样品检测时无扩增,表明其特异性良好;该方法检测下限可达到1.0×101copies/μL,比常规RT-PCR敏感性高10倍;组内变异系数介于0.1%~0.29%之间,组间变异系数介于0.1%~0.81%之间,说明该检测方法重复性较好。上述结果表明,本研究建立的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法可以作为S...
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