【摘 要】
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为了探讨H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞增殖及其培养基过氧化氢含量的影响,将不同剂量的H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞单层,吸附1.5 h后弃去再加入新的DMEM维持液,每隔12h取上
【机 构】
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华南农业大学兽医学院,广州市正安食品有限公司,西藏自治区日喀则地区种畜站,西藏自治区日喀则地区畜牧总站疫控中心,广东省兽用生物制品技术研究与应用企业重点实验室
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为了探讨H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞增殖及其培养基过氧化氢含量的影响,将不同剂量的H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞单层,吸附1.5 h后弃去再加入新的DMEM维持液,每隔12h取上清液测定HA滴度、乳酸脱氢酶(LDH)活力以及过氧化氢(H2O2)含量.同时,本试验采用MTT法测定不同剂量病毒接种对MDCK细胞增殖的影响.结果表明,以10-3 EID50、10-4 EID50病毒剂量接种细胞后,病毒HA滴度分别在36 h和48 h达到滴度最大值(9 log2)以及LHD活力的最大值,上清液中H2O2含量在48 h时显著(P＜0.05)高于空白对照组和低剂量病毒接种组;接种病毒后36 h以内对MDCK细胞生长具有显著地(P＜0.05)促进作用,之后会显著(P＜0.05)抑制细胞的增殖.综上所述,H9亚型禽流感病毒能在前期促进MDCK细胞的增殖,随着病毒增殖对细胞损伤加大,LDH漏出量增加,促凋亡因子H2O2参与介导了这一过程.
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