【摘 要】
:
目的 探讨circ_0001955对肺癌细胞恶性行为的影响及可能机制.方法 RT-qPCR检测41例肺癌组织及癌旁组织中circ_0001955和miR-188-3p表达,分析肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p表达的相关性.体外培养肺癌细胞A549,双荧光素酶报告基因实验验证A549细胞中circ_0001955和miR-188-3p调控关系.构建干扰si-circ_0001955或过表达miR-188-3p的A549细胞,用CCK-8法和克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术及蛋白质印
【机 构】
:
大连市友谊医院 老年肿瘤内科 辽宁省大连市, 116000;大连医科大学附属第一医院胸外科 辽宁省大连市, 116000;大连市友谊医院 老年病科 辽宁省大连市, 116000
论文部分内容阅读
目的 探讨circ_0001955对肺癌细胞恶性行为的影响及可能机制.方法 RT-qPCR检测41例肺癌组织及癌旁组织中circ_0001955和miR-188-3p表达,分析肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p表达的相关性.体外培养肺癌细胞A549,双荧光素酶报告基因实验验证A549细胞中circ_0001955和miR-188-3p调控关系.构建干扰si-circ_0001955或过表达miR-188-3p的A549细胞,用CCK-8法和克隆形成实验、划痕实验、流式细胞术及蛋白质印迹法分别检测细胞增殖、迁移、凋亡及细胞中Bax和Bcl-2蛋白表达.结果 与癌旁组织比较,肺癌组织中circ_0001955表达升高(P<0.05),miR-188-3p表达降低(P<0.05).肺癌组织中circ_0001955和miR-188-3p的表达呈负相关(r=-0.978,P<0.05).circ_0001955可靶向结合miR-188-3p,且干扰circ_0001955促进A549细胞中miR-188-3p表达.干扰circ_0001955或过表达miR-188-3p降低了A549细胞集落形成数、划痕愈合率及细胞中Bcl-2蛋白表达(P<0.05),提高了细胞增殖抑制率、凋亡率及Bax蛋白表达(P<0.05).干扰miR-188-3p逆转干扰circ_0001955对A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响.结论 干扰circ_0001955可能通过上调miR-188-3p阻碍肺癌细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡.
其他文献
目的 探究胰激肽原酶(PK)对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病肾病(DN)大鼠肾纤维化的影响及机制.方法 将雄性Wistar大鼠随机分为健康对照组(Control)、模型组(Model)、低、高剂量胰激肽原酶组(75、150 U/kg)各15只.测定各组大鼠尾动脉收缩压、生化指标及蛋白表达水平;观察肾组织病理形态改变.结果 150 U/kg组大鼠在3、6、9周时的收缩压及干预后的尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、β-2微球蛋白(β2-MG)、Caspase-3、Caspase-9表达水平显著低于Model
目的 探究干扰Netrin-1对白血病K562细胞体内外增殖迁移的影响.方法 将shRNA Netrin-1载体和空质粒载体转染至K562细胞,细胞随机分为3组:Control组、shRNA-NC组和shRNA2-Netrin-1组.克隆形成实验检测克隆形成率;Western印迹检测Netrin-1、Ki67、Survivin蛋白表达;Transwell检测侵袭细胞数;划痕实验检测划痕愈合率;建立白血病K562细胞裸鼠移植瘤模型,检测30 d肿瘤体积和肿瘤重量变化;免疫组化检测Ki67、VEGF阳性细胞数
目的 系统评价中医活血化瘀法治疗肺血栓栓塞症(PTE)的临床疗效和安全性.方法 检索PubMed、Embase、中国知网(CNKI)、万方(WangFang)、维普(VIP)等数据库自建库起至2021年4月30日止,有关活血化瘀法治疗PTE的随机对照试验研究文献.由2名研究员进行文献筛选以及数据提取后,采用RevMan5.4软件进行Meta分析.结果 最终纳入21项研究,共1798例PTE患者.Meta分析结果显示,与单纯常规西医治疗相比,活血化瘀法联合常规西医治疗肺血栓栓塞症患者,可有效提高临床疗效(O
目的 探讨党参、黄精和三七等中药提取物对超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)基因启动子活性的影响.方法 使用乙醇超声萃取和旋转蒸发的方法从党参、黄精和三七等中药中制备醇提物;然后从人胚肾293T(HEK-293T)细胞基因组DNA中扩增SOD基因启动子DNA片段并连接入启动子报告质粒pGL3-Basic中,通过荧光素酶活性检测成功构建pGL3-SOD启动子报告质粒;细胞活力测定(MTS法)确定了中药提取物的使用浓度后,将pGL3-SOD启动子报告质粒转染HEK-293T细胞,
目的 探讨白桦脂酸对H2O2诱导的PC12神经细胞氧化损伤和凋亡的影响.方法 PC12神经细胞分成Control、Model(H2O2刺激)、BA-L(1μmol/L的白桦脂酸和H2O2刺激)、BA-M(2μmol/L的白桦脂酸和H2O2刺激)、BA-H(4μmol/L的白桦脂酸和H2O2刺激)、BA-H+PMA组(1μmol/L的白桦脂酸、H2O2、NF-κB信号通路激活剂PMA刺激),CCK-8方法分析细胞增殖活性变化,流式细胞术分析细胞凋亡水平变化,Western印迹分析细胞中Bax、Bcl-2、P
目的 研究环状RNA配对同源结构域基因1(circPITX1)和微小RNA miR-1294对结直肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响.方法 RT-qPCR分析结直肠癌组织中circPITX1和miR-1294表达.将si-cir-cPITX1、si-NC组、miR-1294模拟物、miR-NC、pcDNA-circPITX1、pcDNA、si-circPITX1+anti-miR-1294、si-circPITX1+anti-miR-NC分别转染SW620细胞,采用CCK-8法、平板克隆实验、流式细胞术评
目的 探讨丙泊酚对鼻咽癌C666-1细胞的作用及机制.方法 C666-1细胞分为4组:对照组、丙泊酚22、33、44μmol/L组.CCK-8实验、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞活力、凋亡、侵袭和迁移能力;Western印迹检测凋亡和侵袭相关蛋白表达.JNK抑制剂SP600125或ERK1/2抑制剂U0126与丙泊酚(44μmol/L)单独或联合处理细胞后,Western印迹检测JNK和ERK1/2蛋白磷酸化,CCK-8检测细胞活性.构建裸鼠移植瘤,免疫组化检测瘤组织中p-JNK、p-ER
目的 研究Chemerin/CMKLR1对RF/6A细胞自噬和血管形成的影响.方法 将RF/6A细胞分为对照组,1、10、100 nmol/L chemerin组,CMKLR1受体抑制剂组(10 nmol/L chemerin+α-NETA).培养24 h后利用Western印迹检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1表达水平,CCK8法、Transwell及基质胶法检测RF/6A细胞增殖,迁移,管腔形成.结果 LC3、Beclin-1在3种浓度chemerin组表达水平较对照组高(P<0.05),与10
目的 探究外周血单个核细胞(PBMCs)线粒体转录因子A(TFAM)、生长分化因子-15(GDF-15)、淋巴细胞β1肾上腺素受体(β1-AR)的mRNA对近期主要心血管不良事件(MACE)的预测效能.方法 选取延安大学附属医院2017年4月~2019年10月CHF患者127例作为研究对象,分析外周血指标与心肌重构指标[左心房内径(LAP)、左室后壁厚度(LVPW)、左室舒张末内径(LVEDD)、左室质量指数(LVMI)、左室重构指数(LVRI)]、LVEF相关性及对MACE的预测价值.结果 PBMCs中
目的 探究叉头框蛋白S1(forkhead box S1,FOXS1)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达及其临床预后价值.方法 分别采用免疫组化和RT-qPCR检测108对CRC组织中FOXS1蛋白和mRNA的表达水平,进一步统计分析FOXS1表达与患者临床病理特征的相关性及其预后价值.结果 与癌旁组织相比,FOXS1蛋白和mRNA在CRC组织中的表达水平均显著上调,且其高表达与肿瘤分化程度、T分期、N分期、TNM分期、淋巴脉管浸润及神经侵犯显著相关(P均<0.05);生存分