牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白表位鉴定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ssssssfs

【摘要】

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为鉴定牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD蛋白抗原表位，本研究利用pET-30a原核表达系统表达、纯化了重组gD蛋白，采用超速离心纯化的IBRV免疫BALB／c小鼠，取脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合

【作者】

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周跃辉朱远茂任建乐严昊王雪枝马磊史鸿飞薛飞

【机构】

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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物传染病研究室

【出处】

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中国预防兽医学报

【发表日期】

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2015年11期

【关键词】

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牛传染性鼻气管炎病毒 gD蛋白单克隆抗体表位鉴定 infectious bovine rhinotracheitis virus gD protein

【基金项目】

：

哈尔滨市科技攻关计划项目（2012AA6BN020）,公益性行业（农业）科研专项经费（201003060-04）,国家科技支撑计划子课题（2012BAD12803-3）,兽医生物技术国家重点实验室基本科研业务专项经费（SKLVBP201424）

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为鉴定牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）gD蛋白抗原表位，本研究利用pET-30a原核表达系统表达、纯化了重组gD蛋白，采用超速离心纯化的IBRV免疫BALB／c小鼠，取脾淋巴细胞与SP2／0细胞进行融合，以重组gD蛋白作为包被抗原，通过间接ELISA筛选出一株稳定分泌抗gD蛋白的MAb杂交瘤细胞株（1G3）。间接免疫荧光结果表明：MAb与IBRV呈阳性反应，中和试验测定其腹水中和效价为1：32。利用肽扫描技术原核表达GST融合短肽对MAb1G3识别的抗原表位进行筛选鉴定，结果表明：该MAb识别的抗原表位为

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