【摘 要】
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目的 通过构建稳定沉默miR-155人胃腺癌SGC-7901细胞系,探讨miR-155参与胃癌的生物学行为.观察清热化湿方对胃癌细胞的增殖、周期、侵袭和迁徙,以及TGF-β、SMAD2、CyclinD1的表达水平变化,分析清热化湿方防治胃癌的机制.方法 应用基因转染技术构建稳定沉默miR-155胃癌SGC-7901细胞系,观察胃癌细胞的生物学行为变化.应用血清药理学的方法制备舍药血清,分为空白对照组(control)、阴性对照组(sh-NC)、sh-miR-155组、治疗组(低、中、高剂量)即sh-miR
【机 构】
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广西中医药大学,广西南宁530000;广西中医药大学附属瑞康医院,广西南宁530000
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目的 通过构建稳定沉默miR-155人胃腺癌SGC-7901细胞系,探讨miR-155参与胃癌的生物学行为.观察清热化湿方对胃癌细胞的增殖、周期、侵袭和迁徙,以及TGF-β、SMAD2、CyclinD1的表达水平变化,分析清热化湿方防治胃癌的机制.方法 应用基因转染技术构建稳定沉默miR-155胃癌SGC-7901细胞系,观察胃癌细胞的生物学行为变化.应用血清药理学的方法制备舍药血清,分为空白对照组(control)、阴性对照组(sh-NC)、sh-miR-155组、治疗组(低、中、高剂量)即sh-miR-155+(5％、10％、20％含药血清),CCK8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡,Transwell法检测细胞的迁徙和侵袭,qRT-PCR、Western-blotting检测细胞TGF-β、SMAD2、CyclinD1 mRNA及蛋白表达水平.结果 沉默miR-155可促进胃癌SGC-7901细胞增殖、迁徙和侵袭(P＜0.05),促进TGF-β、SMAD2、Cy-clinD1 mRNA及蛋白表达(P＜0.05);清热化湿方通过上调miR-155表达,诱导胃癌SGC-7901细胞的凋亡,抑制胃癌SGC-7901细胞增殖、迁徙和侵袭(P＜0.05);并且抑制胃癌SGC-7901细胞TGF-β、SMAD2、CyclinD1 mRNA及蛋白表达(P＜0.05).结论 稳定沉默miR-155可上调TGF-β、SMAD2、CyclinD1表达,促进胃癌进展.清热化湿方可上调miRNA155的表达,抑制TGF-β、SMAD2、CyclinD1的表达,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖、迁徙和侵袭,达到协同防治胃癌的效用.
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