【摘 要】
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目的从昆明鼠睾丸中克隆Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染支持细胞,以便用作培养精原干细胞（SSCs）的滋养层.方法以5日龄昆明鼠为材料,提取小鼠睾丸组织中总RNA后,以RT-PCR技术
【机 构】
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安阳师范学院体育系,军事医学科学院基础医学研究所,黄淮学院生物工程系
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30972090）, 河南省自然科学基金资助项目（102300410036）, 河南省高校科技创新人才资助计划（2011HASTIT031）, 河南省高校青年骨干教师资助计划, 黄淮学院青年骨干教师资助计划, 总后卫生项目（08ZL030）
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目的从昆明鼠睾丸中克隆Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染支持细胞,以便用作培养精原干细胞（SSCs）的滋养层.方法以5日龄昆明鼠为材料,提取小鼠睾丸组织中总RNA后,以RT-PCR技术克隆小鼠睾丸Bmi1基因,构建真核表达载体,并转染TM4细胞（睾丸支持细胞株）,在转染后40 h进行免疫荧光鉴定.结果成功克隆小鼠睾丸Bmi1基因的cDNA,测序正确;免疫荧光细胞染色显示,转染后的支持细胞中有Bmi1蛋白表达.结论本研究为以转染了Bmi1基因的支持细胞作饲养层培养SSCs奠定了基础.
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