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苦荞16kD过敏蛋白(Tartarybuckwheat16kDallergen,TBWl6)是定位于种子胚中的过敏蛋白,其生物学功能未知。该研究以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得苦荞过敏原TBWl6基因的序列为基础,构建TBWl6成熟蛋白的原核表达载体pET47b—TBWl6,实现了其在大肠杆菌BL21Star(DE3)中的高效表达。结果表明:该过敏原以包涵体的形式表达,经包涵体复性及金属离子螯合层析纯化了目标蛋白;以1,4丁二醇二缩水甘油醚环氧基介导的蛋白偶联技术固定化TBWl6于SepharoseCL