【摘 要】
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目的探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖、
【机 构】
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福建医科大学附属协和医院肝胆外科,福建省肝胆研究所,福建医科大学病原生物学系,
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目的探讨幽门螺杆菌(Hp)对人类胆管癌细胞增殖和凋亡的影响,以及该影响的细胞内信号转导途径。方法用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法和流式细胞仪法检测Hp对胆管癌细胞增殖、凋亡及细胞周期分布的影响,利用免疫细胞化学和凝胶电泳迁移率变动实验(EMSA)分析细胞核转录因子NF-KB在Hp作用前后的表达活化情况;使用特异性NF-KB阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)阻断NF-KB的活化,利用细胞免疫化学技术和RT-PCR半定量技术分析比较抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL在转录因子NF-KB失活前后的表达情况。结果在MOI值(细菌与细胞浓度比)为0.5∶1的状态下,Hp对QBC939细胞有促增殖作用,第1、3d的增殖率分别为(15.24±4.2)%和(34.18±2.6)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。在该MOI值时无诱导细胞凋亡作用,但可推动细胞周期的进展;在此过程中伴有细胞NF-KB活化和抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL表达上调;PDTC阻断实验证明抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-XL的表达受到NF-KB活性的调控。结论幽门螺杆菌—核转录因子NF-KB抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-XL传导通路的活化在胆管癌细胞的增殖、凋亡及恶性转化中可能具有重要作用。
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