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目的 探讨超氧化物歧化酶(SOD)复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞(AM)Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用,为尘肺的早期防治提供依据.方法 收集在某专科医院进行大容量双肺灌洗治疗的0+接尘工人、Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者(共50例)的肺泡灌洗液中的细胞成分,将每例的AM分为非处理组、SOD组、Fas/FasL组.分别取5×106个细胞于DMEM中纯化培养2 h,3组均换新的DMEM,SOD组加SOD复合酶200 U/ml、Fas/FasL组加抗肿瘤坏死因子α((TNF-α)抗体50 ng/ml、抗-TRAIL抗体200 ng/ml后继续培养24 h.取1×106个AM进行细胞裂解,用western blot方法检测Fas、FasL、Caspases-8、Caspases-3蛋白表达,用quantity one 7.0图像分析软件测定各蛋白的相对含量.采用末端脱氧核酸转移酶(TdT)介导的duTP缺口末端标记技术(TFUNEL)检测AM凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳法定性检测AM DNA片断化.结果 SOD组、Fas/FasL组凋亡指数分别为(9.50±2.76)%和(14.01±2.56)%,均低于未处理组[(19.18±2.83)%],差异有统计学意义(P＜0.05);未处理组呈现细胞凋亡的特征性DNA梯状带,Fas/FasL组梯状带隐约可见,SOD组未见特征性梯状带.SOD组Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达水平均低于未处理组和Fas/FasL组,差异有统计学意义(P＜0.05).不同处理组各期尘肺的AM Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 SOD复合酶可下调Fas/FasL系统的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平,抑制AM的凋亡.
