【摘 要】
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目的 探讨下调同源异型盒基因A5(HOXA5)表达对胶质瘤细胞增殖能力和细胞周期的影响.方法 应用生信分析方法,计算机检索CGGA数据库,下载mRNAseq-693和mRNAseq-325芯片数据,获取低级别胶质瘤(WHO分级Ⅱ级)和高级别胶质瘤(WHO分级Ⅲ、Ⅳ级)HOXA5 mRNA表达及病人生存信息;以HOXA5表达水平的平均值为界限,将高级别胶质瘤分为低表达组和高表达组.体外培养人胶质瘤细胞株U87和U251,使用Lipofectamine 2000法将HOXA5 siRNAs和阴性对照siRNA
【机 构】
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210029南京,南京医科大学第一附属医院神经
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目的 探讨下调同源异型盒基因A5(HOXA5)表达对胶质瘤细胞增殖能力和细胞周期的影响.方法 应用生信分析方法,计算机检索CGGA数据库,下载mRNAseq-693和mRNAseq-325芯片数据,获取低级别胶质瘤(WHO分级Ⅱ级)和高级别胶质瘤(WHO分级Ⅲ、Ⅳ级)HOXA5 mRNA表达及病人生存信息;以HOXA5表达水平的平均值为界限,将高级别胶质瘤分为低表达组和高表达组.体外培养人胶质瘤细胞株U87和U251,使用Lipofectamine 2000法将HOXA5 siRNAs和阴性对照siRNAs分别转染U87和U251细胞;CCK-8和平板克隆形成实验评估胶质瘤细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期;免疫印迹法检测蛋白表达水平.结果 生信分析结果显示:高级别胶质瘤HOXA5表达水平均显著高于低级别胶质瘤(P＜0.01);HOXA5高表达组高级别胶质瘤病人中位生存时间较低表达组明显缩短(P＜0.01).体外细胞实验结果:敲低HOXA5表达,U87和U251细胞的增殖率和克隆集落数量显著降低(P＜0.01),U87和U251细胞GO/G1期细胞百分比显著增高(P＜0.01),U87和U251细胞CDK4蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论 胶质瘤HOXA5呈高表达,病理级别越高,表达水平越高,病人生存预后越差.敲低HOXA5表达,明显降低CDK4表达,使细胞周期停滞在GO期,明显抑制胶质瘤细胞的增殖.
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