【摘 要】
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目的探讨不同浓度西洛他唑对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及其可能的调控机制。方法实验分为6组，分别为DMEM阴性对照组（对照组），不同浓度西洛他唑组（共5组，分别给予1.0×10-7 、2.5×10-7、5.0×10-7、7.5×10-7和1.0×10-6 mol/L西洛他唑干预）。细胞计数和四唑盐（MTT）比色试验分析西洛他唑对VSMC增殖能力的影响，流式细胞计数仪分析细胞周
【机 构】
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100101北京，解放军第三O六医院心血管内科,南京军区福州总医院心内科,沈阳军区大连二一O医院心内科,总装备部武汉军事代表局驻长沙地区军事代表室,安徽医科大学附属安庆医院老年病,北京市健宫医院心内科
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目的探讨不同浓度西洛他唑对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的影响及其可能的调控机制。
方法实验分为6组，分别为DMEM阴性对照组（对照组），不同浓度西洛他唑组（共5组，分别给予1.0×10-7 、2.5×10-7、5.0×10-7、7.5×10-7和1.0×10-6 mol/L西洛他唑干预）。细胞计数和四唑盐（MTT）比色试验分析西洛他唑对VSMC增殖能力的影响，流式细胞计数仪分析细胞周期分布，TUNEL染色检测细胞凋亡，RT-PCR和Western blot方法分析给药前后视网膜母细胞瘤基因Rb、p53和p21基因的mRNA和蛋白表达水平的变化。
结果西洛他唑可抑制血管平滑肌细胞增生，使血管平滑肌细胞阻滞于G1期，且该效应呈现明显的剂量依赖性。高浓度的西洛他唑（7.5×10-7和1.0×10-6 mol/L）可诱导血管平滑肌细胞凋亡。西洛他唑各浓度组p53基因的mRNA和蛋白表达水平均高于对照组，其中2.5×10-7 、5.0×10-7和7.5×10-7 mol/L组mRNA表达水平与对照组比较差异有统计学意义（P均<0.05），1.0×10-6 mol/L组差异更为显著（3.22±0.45比1.75±0.32, P<0.01），西洛他唑7.5×10-7 mol/L组蛋白表达水平与对照组比较差异有统计学意义（P<0.05），1.0×10-6 mol/L组差异更为显著（0.53±0.11比0.18±0.06, P<0.01）。西洛他唑1.0×10-7 、2.5×10-7和5.0×10-7 mol/L组p21 mRNA表达水平均显著高于对照组 (1.86±0.19、2.20±0.24和 2.10±0.18比1.21±0.18, P均<0.05)，西洛他唑1.0×10-7 mol/L和2.5×10-7 mol/L组Rb mRNA表达水平均显著高于对照组（P均<0.05），5.0×10-7 mol/L组则更为显著（0.89±0.07比0.38±0.04, P<0.01） 。而西洛他唑7.5×10-7和1.0×10-6 mol/L组p21的 mRNA表达水平则显著低于对照组(0.81±0.09比1.21±0.18, P<0.05和0.36±0.10比1.21±0.18，P<0.01)，Rb mRNA的表达水平亦均显著低于对照组(0.12±0.02和0.11±0.02比0.38±0.04，P均<0.01)。随着西洛他唑浓度的增加，p21和Rb基因的蛋白表达水平亦呈现先升高后下降的态势。
结论西洛他唑可显著抑制体外培养的大鼠VSMC增殖，机制可能为通过Rb-p53-p21通路抑制VSMC增殖，并通过p53基因过表达诱导VSMC凋亡。
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