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目的建立高效液相色谱法测定乌参醒脑滴丸中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(二苯乙烯苷)含量的方法。方法采用SunFireTM C18(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,柱温为30℃;以乙腈-水(体积比20∶80)为流动相,流速为1.0 mL.min-1;检测波长为320 nm。结果二苯乙烯苷在12.75～85.0μg.mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.8%,RSD为2.16%。结论该法可用于乌参醒脑滴丸中二苯乙烯苷的含量测定。